Определение фактора Виллебранда ( vWF)
Определение vWF проводится в основном для:
• диагностики и последующего мониторинга
врожденной или приобретенной болезни Вил
лебранда;
• диагностики тромбофилии;
• дифференциальной диагностики гемофилии А.
Имеется несколько методических подходов
для диагностики болезни Виллебранда. Один из алгоритмов диагностики болезни Виллебранда представлен в табл. 25.
Концентрация vWF определяется методами иммунотурбидиметрии, ELISA, «ракетным» электрофорезом. Связывающая способность фактора Виллебранда с коллагеном определяется в мик-
роплашках, покрытых коллагеном, методом ELISA. Результат выражается как % от нормы. Состав субъединиц определяется электрофорезом в геле агарозы или иммуноблотом. Функциональная активность определяется методом агглютинации фиксированных или отмытых тромбоцитов или агрегации в богатой тромбоцитами плазме при индукции ристомицином (Ристоцетин®). Метод с хромогенными субстратами в настоящее время рекомендуется использовать только как ориентировочный.
Алгоритмы дифференциальной диагностики приводятся в разделе, посвященном болезни Виллебранда.
Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ
Таблица 25
Алгоритм диагностики болезни Виллебранда
|
| Определение с использованием хромогенного субстрата |
Определение фактора X с использованием хромогенного субстрата
Определение фактора X - один из самых распространенных методов с использованием хромогенных субстратов. Это объясняется тем, что по активности фактора Ха в последнее время все больше и больше контролируют анти-коагулянтный эффект низкомолекулярных ге-паринов (табл. 20). Появились предложения контролировать лечение непрямыми антикоагулянтами также с помощью определения фактора Ха.
В тесте используют фермент яда гадюки Рассела, активирующий фактор X (RVV-X - factor X activation enzyme from Russel viper venom), или яда гюрзы обыкновенной - лебетоксовый тест. Ак-
тивный фактор Ха определяют в прямой реакции с хромогенным субстратом, в частности с Pefa-chrome® FXa (фирма «DADE Behring Marburg GmbH», Германия). Принцип метода представлен на рис. 104.
