Механические коагулометры

Принцип работы механических коагуломет-ров представлен на рис. 83. В одном из вариан­тов кювета с плазмой вращается в наклонном

 

Рис . 83. Принцип работы механического коагуломет -

ра . Кювета с плазмой расположена под наклоном и вра­щается, шарик стоит на месте, не вращается. В момент свертывания шарик захватывается сгустком; как только шарик уходит от датчика, меняется магнитное поле, при­бор регистрирует момент свертывания плазмы

положении. Металлический шарик в кювете нач­нет вращаться при свертывании плазмы. Момент захвата шарика выпавшим сгустком и начало его вращения вместе с кюветой фиксируется магнит­ным датчиком. При других вариантах регистри­руется прекращение вращения внутри кюветы магнитной мешалки, захват сгустка опускаю­щимся в кювету крючком или иные схемы, ос­нованные на переходе жидкой плазмы в сгусток. Механические коагулометры характеризуются высокой надежностью и простотой в обслужи­вании. Кроме того, они могут работать с цель­ной кровью. Основные проблемы возникают в ситуациях, когда формируется неплотный сгус­ток, например при использовании гепарина. В этих случаях выпадающий фибрин часто не мо­жет сразу увлечь за собой механическое устрой­ство, результаты получаются плохо воспроизво­димыми. Другой проблемой является формиро­вание на шарике, мешалке или других устрой­ствах, погруженных в кювету, белковых конгло­мератов, которые мешают регистрации.

Оптико - механические коагулометры

Коагулометры этого класса характеризуют­ся способностью регистрировать выпадающие хлопья фибрина даже без формирования плотно­го сгустка, что бывает при приеме пациентами ан­тикоагулянтов, а также в случаях коагулопатий. Принцип оптико-механического коагулометра представлен на рис. 84. За счет использования следящей схемы регистрируется изменение пода­ваемого на лампу напряжения, чтобы обеспечи­вался заданный световой поток, проходящий че­рез кювету с образцом. В этом случае резко умень­шается влияние исходной плотности плазмы, ее иктеричности и липемичности, в принципе воз­можно исследовать свертывание плазмы с тром­боцитами.

Турбидиметрические коагулометры

Турбидиметрические коагулометры регис­трируют момент свертывания крови по приро­сту оптической плотности (рис. 85). При свер­тывании плазмы происходит резкое изменение светопропускания или рассеивания. В коагуло-метре программируется, при каком приросте

 

Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ

 

 

О 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Время, с

Рис . 84. Принцип регистрации выпадающего фибрина оптико - механическим коагулометром . Выпавшие в кювете нити фибрина меняют световой поток, падающий на фото­диод. Фотодиод связан через следящую схему компенса­ции с напряжением на лампе. В результате на лампу пода­ется такое напряжение, которое меняет яркость свечения лампы, чтобы световой поток, попадающий на светодиод, поддерживался в заданном диапазоне. По изменению на­пряжения на лампе регистрируется начало выпадения фиб-ринового сгустка

Рис . 85. Принцип регистрации момента образования сгустка турбидиметрическим коагулометром . При свер­тывании плазмы происходит резкое увеличение оптичес­кой плотности в фотометрической ячейке. Коагулометр определяет время от внесения активатора свертывания до момента изменения оптической плотности на ДА (напри­мер, на 0,1 ед. оптической плотности)

оптической плотности по отношению к исход­ному уровню (ΔА) регистрируется момент свер­тывания. Время от внесения в оптическую кю­вету индуктора свертывания до момента дости­жения заданного ΔА определяется как время свертывания плазмы в исследуемом тесте. Тур-бидиметрический принцип используется при определении показателей свертывания плазмы на многофункциональных фотометрах и биохи­мических анализаторах. Фотометрический ка­нал при этом программируется по методу «вре­мя достижения фиксированной величины аб­сорбции». Программы для исследования гемо­стаза стали использовать даже на многофунк­циональных плашечных фотометрах, в которых свертывание плазмы исследуется на стриппах или планшетах.

Основными преимуществами оптических си­стем измерения являются:

1. Более точные результаты измерений при низ­
ких показателях свертывания. Полностью
исключена проблема «слабого сгустка».

2. Исключено загрязнение пробы, так как отсут­
ствуют мешалки и другие механические ком­
поненты.

3. Имеется возможность снижения объема про­
бы, так как не нужно место под механичес­
кие компоненты (мешалки), это важно, осо­
бенно в педиатрии. Кроме того, уменьшает­
ся расход реагентов.

4. Эргономичность и удобство работы.
Типичным представителем этого семейства

приборов является оптический двухканальный коагулометр KG-1 производства компании «Сог-mау» (рис. 86).

Нефелометрические коагулометры

Нефелометрические коагулометры определя­ют момент образования сгустка по изменению рассеяния света. Новейшие разработки в этой области технологий нашли воплощение в коагу-лометрах фирмы «Sysmex» (Япония), в которых используется принцип определения сгустка по бо­ковому рассеиванию света (рис. 87). Метод рас­сеивания обеспечивает высокое качество анали­зов - высокую специфичность и чувствительность метода детекции сгустка даже для сложной липе-мичной или иктеричной плазмы.

 

Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ

 

 



 

 

Рис . 86. Оптический двухканальный коагулометр KG -1 производства компании «Со rm ау» . Точность результатов повышается за счет синхронизации времени попадания ре­агента в измерительную кювету и запуска отсчета времени, а также исключения из применения магнитных мешалок в измерительных кюветах, Прибор эргономичен, термостат для проб и реагентов размещен в самом приборе, у кювет есть перемычки и держатели для удобства переноса из термо­стата в измерительные ячейки. Работа на приборе эконом­на, так как снижен расход реагентов за счет уменьшения объема кювет, использования многоразовых кювет

Рис . 87. Нефелометрический принцип измерения све­ торассеяния , заложенный в основу определения момен­та выпадения сгустка на коагулометрах фирмы «Sysmex» (Япония). Метод позволяет повысить точность измерений и их воспроизводимость до 2-3%, а также снизить влияние на результат самого образца. Анализаторы работают на любых реагентах (в том числе на российских)

 

В табл. 15 указаны преимущества и недостат­ки автоматизированных коагулометров, исполь­зующих разные принципы регистрации выпада­ющего сгустка.

Современные коагулометры сочетают в од­ном приборе несколько методов измерения, по-

этому могут использоваться для комплексной оценки гемостаза. Так, фирма «Sysmex» предла­гает серию коагулометров с разными возможно­стями и производительностью для любой клини­ко-диагностической лаборатории любого уровня исследования гемостаза (рис. 88).

 

Таблица 15

Преимущества и недостатки различных методов обнаружения сгустка

 

Методы Преимущества Недостатки
Механический Принципиальная возможность работы на цельной крови, высокая толерантность к типу используемых реагентов и пробирок, низкая стоимость анализаторов Низкая чувствительность - нет детекции слабых сгустков, необходимо применять мешалки в пробах
Оптико-механический Точность больше, чем в механическом мето­де, перемешивание пробы во время снятия показаний Чувствительность ниже нефело-метрического метода, необходимо приме­нять мешалки в пробах
Турбидиметриче-ский Чувствительность выше предыдущих мето­дов, низкая стоимость анализаторов Чувствительность ниже нефело-метрического метода
Нефело­метрический Высокая чувствительность, высокая точность измерения Высокая стоимость прибора

 


 

Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ

 


 

Рис . 88. Коагулометры фирмы « Sysmex »