Вольтамперометрическое (ВА) измерение подготовленной пробы
1) В кварцевый стаканчик поместить отмеренную с помощью пипетки или дозатора аликвоту полученного фильтрата 0,1÷1,0 см3 с точностью до 0,01 см3. Довести объём пробы до 10 см3 раствором фонового электролита
2) Поместить стаканчик с анализируемым раствором в электролитическую ячейку.
3) Опустить в раствор индикаторный (стеклоуглеродный) электрод и электрод сравнения (хлорсеребрянный). Подключить электроды к прибору, устанавливая потенциал -0,30 В и чувствительность прибора 4 ∙10-9…1 ∙10-9 А/мм. Включить газ азот, в течение 180 с. удалять из раствора кислород пропусканием азота.
4) Провести процесс электролиза (электронакопления) при потенциале -0,30 В в течение 30 сек при автоматическом перемешивании раствора.
5) Отключить газ и через 10 сек начать регистрацию вольамперограммы в диапазоне потенциалов от -0,30 В до +1,1 В.
6) После снятия вольтамперограммы стеклоуглеродный электрод вынимают из электрохимической ячейки, ополаскивают дистиллированной водой, опускают на 2-3 с в стаканчик с этиловым спиртом и протирают рабочую поверхность электрода фильтровальной бумагой.
7) Повторить операции последовательно 3)…6) три раза.
8) Измерить линейкой высоты анодных пиков. Если высота анодного пика витамина С превышает 200 мм, то уменьшают чувствительность прибора (загрубить), меньше 5 мм – увеличивают чувствительность прибора. После чего вновь последовательно повторяют операции 4)…6) три раза.
9) В стаканчик с анализируемым раствором с помощью пипетки или дозатора внести добавку аттестованной смеси определяемого витамина в таком объёме, чтобы высота пита на вольтамперной кривой увеличилась примерно в два раза по сравнению с первоначальной (20-30 мкл с молярной концентрацией витамина 300 мг/дм3.)
10) Повторить операции последовательно от 4) до 6) три раза.
11) Измерять высоты анодных пиков витамина в пробах с добавкой аттестованных смесей (АС).
12) Вылить содержимое стаканчиков.
Записать результаты измерений анализа проб по форме:
| Определяемый компонент (витамин) | Анализируемая проба (характеристика, номер, дата) | Условия измерений (чувствительность, объём аликвоты) | Высота пика анодного тка компонента в пробе, А | Добавка АС(объем, см3, Сдоб мг/дм3) | Высота пика анодного тока компонента после добавки АС, А |
1) Рассчитать содержание витамина (мг/кг) в пробе по формуле:
I1∙ Cд ∙ Vд ∙Vпр
Xi = ------------------,
(I1-I2) ∙ m ∙Vал
где: i - номер повторности 1, 2 и т.д.;
I1- величина максимального анодного тока витамина в анализируемой пробе, А;
Cд – концентрация аттестованной смеси АС витамина, из которой делается добавка к анализируемой пробе, мг/дм3;
Vд - объём добавки аттестованной смеси АС витамина, см3;
Vпр – объём разведённой анализируемой пробы, см3;
Vал – объём аликвоты анализируемой пробы, взятой для ВА измерений, см3.
Среднее содержание витамина Xcр = (X1+X2)/ 2
2) Результаты считают статистически достоверными при выполнении условия для двух параллельных определений: [Х1-Х2] ≤ r, мг/кг, или мг/100 г. При превышении предела повторяемости r необходимо дополнительно получить ещё два результата параллельных определений.
Значения пределов повторяемости r при доверительной вероятности Р=0,95
| Компонент | Диапазон определяемых концентраций | Предел повторяемости r (для двух результатов параллельных определений) | Предел повторяемости r (для четырёх результатов параллельных определений) | Относительное значение показателя точности (границы погрешности методики), ۵ ,% |
| Витамин В1 | От 0,10 до 0,50 мг/кг включ. | 0,20 ∙ Xcр | 0,25 ∙ Xcр | 38 |
| От 0,50 до 100,00 мг/кг включ. | 0,17 ∙ Xcр | 0,22 ∙ Xcр | 22 | |
|
Витамин В2 | От 0,02 до 1,00 мг/100 г включ. или от 0,20 до 10,00 мг/100 г включ. | 0,22 ∙ Xcр | 0,29 ∙ Xcр | 24 |
| От 1,00 до 500,00 мг/100 г включ. или от 10,00 до 5000,00 мг/100 г включ. | 0,14 ∙ Xcр | 0,18 ∙ Xcр | 14 | |
| Витамин С | От 2 до 3000 мг/кг включ. | 0,20 ∙ Xcр | 0,25 ∙ Xcр | 18 |
3) Представить результаты в виде: (Xcр±∆), мг/кг или мг/100 г продукта, Р=0,95.
∆- значение характеристики погрешности, которое рассчитывается по формуле
∆ = 0,01∙ ۵