Вопросы пунктов 2,3,4,5,6 рассмотрены на примере лейкоза КРС.

Дата: 2025-05-25; Просмотры: 3

Оценка:

0.00 из 5.00 — оценок

Скачиваний: 0

Скачать

Гемобластозы

Содержание.

1. Введение

2. Этиология.

3. Патогенез.

4. Классификация и терминология гемобластозов.

5. Методы прижизненной диагностики.

6. Стадии течения лейкозного процесса

7. Лимфопролиферативные расстройства.

8. Миелопролиферативные расстройства.

Вопросы пунктов 2,3,4,5,6 рассмотрены на примере лейкоза КРС.

Гемобластозы

1. Введение.

Гемобластоз — злокачественное заболевание системы крови, характеризующееся безудержной пролиферацией клеточных элементов в органах кроветворения и наводнением ими периферичес­кой крови. Гемобластозы подразделяют на системные заболевания — лейкозы, а также регионарные — лимфомы.

Эти опухоли возникают в костном мозге, лимфоузлах, селезенке или тимусе и от­носятся либо к лимфопролиферативным, либо к миелопролиферативным расстройс­твам. Термином лейкоз обозначают пато­логическое состояние, при котором нео­пластические клетки присутствуют в кро­ви, костном мозге или одновременно в крови и костном мозге. Исключение со­ставляет неопластическая пролиферация плазматических клеток в костном мозге (множественная миелома), которую к лей­козам не относят. Истинный лейкоз имеет костномозговое происхождение и нео­пластические клетки обычно присутству­ют в крови. Число лейкоцитов у живот­ных с лейкозом может быть низким, нор­мальным или высоким. Термином острый лейкозобозначают лейкоз, характеризую­щийся преобладанием бластных клеток в костном мозге; при хроническом лейкозе в костном мозге и крови присутствуют пре­имущественно полностью дифференциро­ванные клетки. В случае острого лейкоза заболевание обычно быстро прогрессиру­ет (несколько недель или месяцев), тогда как хронический лейкоз развивается мед­ленно и персистирует месяцы и годы.

Лейкоз у человека впервые был описан в 1845 г. Р. Вирховым под названием «лейкемия» (белокровие). Наблюдения за больными пока­зали, что помимо селезенки поражаются и лимфатические узлы, на основании чего Р. Вирхов подразделил встречающиеся в его практике случаи лейкемии на селезеночную, лимфатическую и смешанную формы. Микроскопическим исследованием он обнаружил в этих ор­ганах изменения, характерные для лейкемии. Большую роль в изучении лейкемии сыграли работы Э. Неймана (1870), доказавшего принадлеж­ность костного мозга к кроветворным органам и установившего кост­номозговую форму лейкемии.

С 1858 г. болезнь стали описывать у животных под тем же назва­нием. По данным Г. Добберштайна (1962) и Э. Визнера (1963), лейкемия установлена у 29 видов животных и диких млекопитающих животных, а также многих видов птиц.

Особого внимания заслуживает лейкоз крупного рогатого скота, имеющий более широкое распространение по сравнению с лейкозом других видов животных.

Неизлечимость болезни, снижение или полная потеря продуктив­ности, недоброкачественность, а в ряде случаев и полная непригод­ность мяса и молока, полученных от больного скота, недополучение приплода, гибель ценных племенных животных свидетельствуют о значительном ущербе, наносимом животноводству болезнью.

Для разработки более эффективных мер профилактики и борьбы с данным заболеванием были развернуты широкие гематологические и цитологические исследования в патогенетическом и диагностическом планах. Именно изучение заболеваний системы крови способствовало развитию ветеринарной гематологии и цитологии. Были изучены мор­фологические показатели крови у разных видов животных в возрас­том и породном аспектах, в норме, при всевозможных физиологи­ческих и патологических состояниях организма. Впервые стало воз­можно шире и глубже изучить кроветворение у животных, установить цитоморфологические нормативы кроветворных органов у разных видов животных, изменения при некоторых заболеваниях и, особенно, при различных стадиях и формах гемобластозов крупного рогатого скота.

Определение и сущность болезни в литературе представлены до­вольно разноречиво. Еще в 1916 г. П. Кнут и О. Фолькман рассмат­ривали лейкоз как пролиферативный гиперпластический процесс лимфопоэтической ткани, при котором образуются лимфоидоциты. Э. Визнер (1963) под собирательным названием «лейкоз» подразумевал «все обширные, большей частью пролиферативные, опухолевидные разрастания лейкобластической ткани в лимфатических узлах, селезен­ке, костном мозге и других органах с переваскулярным накоплением лимфоцитов в печени, почках и прочих органах».

По данным других исследователей (Попеску, 1965), лейкемия пред­ставляет собой комплексное заболевание, являющееся результатом неопластической, генерализованной и непрерывной пролиферации одной из лейкоцитарных тканей, сопровождающееся или не сопровож­дающееся поступлением в кровоток пролиферирующих клеток и заканчивающееся, в конце концов, смертельным исходом.

Такое определение автор поясняет тем, что пролиферирующие лейкемические клетки обладают всеми признаками неопластических клеток, однако еще не известно, в чем состоит неопластическое превращение клетки. Клиническое проявление — уже конечная, генерали­зованная стадия болезни, которой предшествует локальное поражение органов. В противоположность реактивной пролиферации, исчезаю­щей с прекращением действия основного фактора, пролиферация при лейкозе продолжается вплоть до смерти больного. И, наконец, лейкемическая картина крови — необязательный признак болезни, иногда она может отсутствовать.

В отношении системности поражения при лейкозах также нет еди­ного мнения. Одни авторы считают, что название «системная болезнь» не подходит для лейкемии, так как в начале болезни возникают от­дельные лейкемические очаги и только потом они развиваются во многих органах и тканях (Попеску, 1965). Другие, наоборот, под системностью понимают не только вовлечение в патологический про­цесс всех кроветворных органов, но и отдельных ростков гемопоэза, других органов, богатых элементами ретикулоэндотелиальной систе­мы, что позволяет на основе гистогенеза образующихся клеток опре­делить различные формы лейкоза (Дульцин и др., 1965, и др.). Если при острых формах лейкоза патологический процесс распространяется повсеместно и носит системный характер, то при хроническом его течении распространяется постепенно с первично пораженного ростка гемопоэза или органа. При гематосаркомах нередко процесс ограничивается определенными органами или системой органов и даже частями органов (Урбанек, 1968).

Формирование взгляда на сущность лейкоза претерпело постепен­ный переход от определения его вначале как гиперпластического, далее как гиперпластически опухолевого и, наконец, как опухолевого про­цесса кроветворной ткани. Одни исследователи придерживались гиперпластической природы лейкоза, а другие считали трудным провести границу между гиперплазией и настоящей опухолью. И. В. Давыдовский (1958) писал, что проблема лейкозов не может быть изолирована от проблемы злокачественного роста тканей, т. е. бластоматоза. Вместе с тем поспешно делать заключение, что это одна и та же проблема, так как нет полного тождества, особенно в морфологическом, клини­ческом и этиологическом отношении.

В последующем все больше исследователей стали придерживаться теории опухолей природы лейкозов, некоторые из них даже полностью отождествляли лейкоз со злокачественной опухолью. К такому выводу пришли Международное общество патологоанатомов (1961) и Всемир­ная организация здравоохранения (ВОЗ, 1961). Это положение отра­жено и в Международной классификации болезней (ВОЗ, 1968), где лейкозы и другие заболевания кроветворной ткани отнесены к ново­образованиям лимфатической и кроветворной ткани.

Таким образом, лейкозы и опухоли имеют свои частные формы проявления и вместе с тем характеризуются общими признаками и патоморфологическими закономерностями развития, позволяющими объединить их в одну группу. Лейкозы — частная форма злокачест­венных новообразований, связанных общей патофизиологической сущностью (Дульцин и др., 1965; Румянцев, 1959; Кудрявцева, 1967: Симонян, 1969, и др.).

2. Этиология.

При изучении этиологии лейкоза животных экспери­ментальные исследования и эпизоотологические наблюдения были на­правлены на выяснение путей передачи и распространения болезни, установления предрасполагающих факторов и предприняты попытки выделения агентов. Отдельные исследователи возникновение лейкоза связывали с почвенно-климатическими и пастбищными условиями зоны распространения болезни, ботаническим составом трав, уровнем кормления коров и их продуктивностью, качественным и количествен­ным составом комплекса микроэлементов кормов и т.д. В последую­щем было доказано, что эти факторы не являются первопричиной возникновения лейкоза, однако могли способствовать активизации агента, вызывающего лейкоз.

Результаты многолетних наблюдений и генеалогических анализов дали основание многим лейкозологам стать сторонниками теории наследственной передачи лейкоза. В то же время другие авторы счи­тали, что болезнь не имеет чисто генетическую природу, наследуется только предрасположенность или устойчивость к ней. Они предполагали возможность наличия семейств, генетически устойчивых к лейко­зу.

Особенности возникновения и распространения лейкоза крупного рогатого скота не исключали возможности и инфекционной его при­роды. Поэтому были поставлены многочисленные опыты по экспери­ментальному воспроизведению болезни путем трансплантации здоро­вым животным патологического материала (кровь, костный мозг, эмульсии пораженных лимфатических узлов, селезенки и других орга­нов). В ряде случаев удалось воспроизвести болезнь на телятах, ягнятах и лабораторных животных путем переноса клеточного и бесклеточного материала от больного лейкозом крупного рогатого скота.

Сторонники вирусной теории рассматривали возникновение лей­коза как обычный инфекционный процесс, при котором заражение происходит контактным путем. Основа вирусной теории происхожде­ния злокачественных опухолей была заложена еще в 1908 г. В. Эллерманом и О. Бангом, которым удалось доказать этиологическую роль вируса при лейкозе кур. Авторы перевили эритролейкоз и миелоидный лейкоз от больных кур здоровым клеточным и бесклеточным фильт­ратом.

Начиная с 1950 г. появились работы Л. Гросса, в которых впервые убедительно было показано существование вирусного этиологического агента лейкоза мышей. Вирус Гросса не обладал строгой видовой специфичностью и вызывал лейкоз у кур низколинейных пород. В последующие годы были выделены многочисленные вирусы лейкоза мышей. В 1960 г. В. М. Бергольцу удалось выделить из лейкозной ткани человека бесклеточный «лейкозный фактор», обладающий свой­ствами вируса. Он отнесен к липонуклеопротеидам. Этот вирус про­ходит через мелкопористые фильтры и вызывает лейкоз у 13% мышей.

Вирусы, выделенные при лейкозе мышей, морских свинок, кошек, и др. были отнесены к группе РНК-содержащих и обозначены как вирусы типа С. При помощи электронной микроскопии удалось об­наружить вирусные частицы при культивировании материалов от больного лейкозом крупного рогатого скота (Uberschcr, 1963, и др.). В опухолевой ткани, молоке, лимфатических узлах (Dutchcr, Nazerian, 1966) и в культурах лимфоцитов (Кукайи, 1973; Валихов и др., 1974, и др.) от больных лейкозом коров были обнаружены вирусоподобные частицы, которые напоминали вирус типа С мышей. После VIII Меж­дународного противоракового конгресса большинство онкологов счи­тали, что вирусами вызываются лейкозы у кур, мышей, крыс, кошек, собак и крупного рогатого скота.

Применение современных методов исследований позволило под­твердить вирусную природу лейкоза крупного рогатого скота, изоли­ровать онковирус типа С, изучить его строение, ультраструктуру и разработать чувствительные метода диагностики. Было доказано, что вирус лейкоза крупного рогатого скота является экзогенным, т. е. не содержит в своем геноме последовательностей, характерных для эндо­генного вируса. Методом электронной микроскопии в вируспродуцирующих лимфоидных клетках были обнаружены «ядерные карманы», а в расширенных канальцах и цистернах эндоплазматического ретикулума — сферические частицы, зрелые вирионы вируса лейкоза круп­ного рогатого скота. Освобождение вирионов из клетки происходит путем почкования на поверхности цитоплазматической мембраны и на концах цитоплазматических выростов клетки. Проникновение ви­рионов вируса лейкоза крупного рогатого скота в клетку осуществля­ется в процессе адсорбции на цитоплазматической мембране и фаго­цитоза. Помимо периферической крови вирус лейкоза крупного рога­того скота обнаружен также в органах и секретах, инфильтрированных лейкоцитами, что свидетельствует о возможности передачи инфекции в естественных условиях. У экспериментальных телят, инокулированных препаратами вируса лейкоза крупного рогатого скота, через оп­ределенные сроки были обнаружены в крови антитела к данному вирусу с последующим проявлением гематологических и клинико-патанатомических изменений, характерных для заболевания лейкозом.

Обнаружение вируса лейкоза крупного рогатого скота позволило разработать иммунологические методы выявления инфицированных животных, т. е. содержащихся в сыворотке крови специфических про­тивовирусных антител. Такими методами являются реакция иммунодиффузии в геле агара (РИД), реакция связывания комплемента (РСК), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноферментный метод (ЕЛИЗА) и др. Среди этих методов наибольшее распространение в производственных условиях получила РИД, позволяющая своевремен­но выявлять инфицированных животных и проводить более эффектив­ные противолейкозные мероприятия.

Основной источник возбудителя инфекции — зараженный орга­низм животного, где происходит сохранение, размножение и накопле­ние этого вируса. Пути выделения вируса из организма не установлены, он не был выявлен в фекалиях, слюне и моче животных-антителоносителей. Вирус локализуется в лимфоцитах крови, которые присутст­вуют в молоке и молозиве коров. Однако в естественных условиях передача вируса лейкоза крупного рогатого скота телятам через мо­лозиво и молоко от инфицированных коров происходит довольно редко. Наиболее часто инфицирование наблюдается при врачебных вмешательствах (взятие проб крови, инъекции препаратов, обрезка копыт и рогов, татуировка и др.), связанных с кровью. До 10—15% случаев обнаруживается интраплацентарная передача вируса от матери плоду. Следовательно, основной путь передачи и распространения вируса — горизонтальный, механизм которого остается невыяснен­ным.

3. Патогенез.

В возникновении и развитии лейкоза существенная роль принадлежит множеству патогенетических факторов. Обнаружение ви­руса лейкоза крупного рогатого скота, применение современных молекулярно-биологических, биохимических, электронно-микроскопи­ческих, иммунохимических, генетических, цитоморфологических и дру­гих методов исследований не выяснили причины избыточного размно­жения клеточных элементов того или иного ростка кроветворения и сущности злокачественной трансформации клетки. Поэтому представления о патогенезе лейкоза в основном исчерпываются сведениями об изменениях данного патологического процесса, устанавливаемых раз­личными методами исследований.

Многочисленные эпизоотологические наблюдения показали, что порода, продуктивность, корма и кормление, климат, характер почвы, пастбища и другие факторы имеют какое-то, если не этиологическое, то, во всяком случае, патогенетическое значение в течении и развитии лейкоза.

Стельность, аборты, отелы стимулировали обострение хронически протекаемого лейкоза. Возможно, что эти и другие факторы активируют дремлющее предрасположение к прояв­лению или прогрессированию лейкозного процесса. Следует при этом отметить, что проявление, становление и прогрессия болезни зависят в основном от возникновения злокачественно трансформированной клетки, нарушения регуляторных, гомеостатических механизмов, а также межклеточных и межорганных связей. Однако существующими методами исследований представляется возможным установить лишь нарушение процессов пролиферации и созревания клеток гемопоэза. Они выражаются в увеличении количества того или иного вида лей­коцитов в периферической крови в результате усиленной их пролифе­рации с последующим повышением числа молодых и малодифференцированных клеток в крови и кроветворных органах и нарушения процесса созревания.

Несмотря на то, что проявлению заболевания предшествует инфицированность животного вирусом лейкоза крупного рогатого скота, установить механизм взаимодействия вируса на трансформацию нор­мальной клетки в злокачественную или на процессы пролиферации и созревания клеток крови пока не представляется возможным. Патоге­нетические особенности начального проявления и дальнейшего разви­тия патологического процесса при лейкозе только констатируются происходящими изменениями без определения их механизма. Ком­плексные клинико-гематологические и цитоморфологические исследо­вания крови и кроветворных органов в динамике развития лейкозного процесса с последующим патоморфологическим анализом материала показали, что все формы гемобластозов у крупного рогатого скота проявляются лишь относительным и абсолютным лимфоцитозом в крови. Дальнейшее прогрессирование болезни выражается

· в нараста­нии количества лейкоцитов (лимфоцитов) в 1 мкл крови до сублейкемического и лейкемического уровня;

· в задержке дифференциации мо­лодых и малодифференцированных клеток, увеличении их количества в кроветворных органах и поступлении в периферическую кровь или образовании атипичных, малигнизированных клеток в пораженных органах при гематосаркомах с последующим поступлением в ток крови;

· в появлении клинических симптомов и патологоанатомических изменениях, характерных для лейкозной патологии.

Многоплановое патогенетическое изучение лейкозов крупного ро­гатого скота позволило установить следующие характерные измене­ния:

· повышение числа клеток, способных синтезировать ДНК;

· нару­шение способности лимфоцитов к бластной трансформации;

· появление клеток с аномалиями в числе хромосом (полиплоидии, анеуплоидии);

· изменение соотношения иммунокомпетентных клеток с опережением темпов пролиферации В-лимфоцитов и Т-супрессоров над таковыми Т-лимфоцитов и Т-хелперов.

Изменения в биохимических процессах выражались:

· в извращении нуклеопротеидного обмена с нарушением синтеза ДНК;

· появлении в организме больных эндогенных, лейкозогенных и бластомогенных ве­ществ;

· нарушении белкового, углеводного и липоидного обменов;

· нарушении обмена триптофана и его производных, содержания нуклеиновых кислот и их метаболитов;

· изменении кислотной и осмотической устойчивости эритроцитов;

· нарушении метаболизма аминокислот, выражающемся в изменении состава свободных аминокислот сыворотки крови;

· изменении концентрации калия, натрия и хлора в сыворотке крови, свидетельствующем о нарушении электролитного гомеостаза;

· увеличении количества нуклеиновых кислот в крови и органах коров, больных лейкозом, наряду с изменением концентра­ции в крови свободных нуклеотидов, мочевой кислоты и активности ферментов — нуклеаз, свидетельствующей о глубоком нарушении об­мена нуклеиновых кислот при развитии лейкоза.

Таким образом, развитие лейкозного процесса сопровождается комплексом цитологических, морфологических, биохимических, имму­нологических и других изменений и реакции организма.

4. Классификация и терминология гемобластозов.

Зарубежными и отечественными исследователями было пред­ложено около 200 классификации опухолей кроветворной ткани. При этом исследователи в основу классификации каждой формы гемобластозов вкладывали какой-нибудь одни из признаков болезни (клиническое проявление, течение болезни, цитоморфологическое изменение крови и кроветворных органов, гистологическая картина и др.).

Долгое время считалось общепризнанной клинико-анатомическая и гистогенетическая классификация лейкозов человека, разработанная X. X. Владосом и Н. А. Краевским в 1953 г. и видоизмененная в 1965 г. По данной классификации, в зависимости от характера клеточных инфильтраций определяются различные формы лейкозов: гемоцитобластоз, миелолейкоз, лимфолейкоз и ретикулез, протекающие с алейкемическим и лейкемическим составом крови. По своему течению они делятся на острые, подострые и хронические. К ретикулезам относили ретикулосаркому, лимфосаркому, лимфогрануломатоз и др.

Классификация лейкозов сельскохозяйственных и домашних жи­вотных создавалась и совершенствовалась по мере накопления данных по клинико-гематологическим, цито- и патоморфологическим особенностям проявления болезни, обнаружения новых нозологи­ческих форм гемобластозов. Некоторые исследователи для характе­ристики гемобластозов использовали эпизоотологические, возрас­тные, клинико-патанатомические и другие принципы. В соответ­ствии с этим применяли такие термины, как эпизоотический и спорадический лейкоз, лейкоз молодняка, зобный лейкоз, кожная форма лейкоза, бычья лейкемия, ювенильный лейкоз, лейкемическое опухание селезенки, лейкемический лимфаденоз, злокачественная лимфома и др. Такой принцип подразделения не может отражать характер различных морфологических проявлений патологического процесса. Исходя из этого, заслуживают внимания те классификации лейкоза животных, в основу которых положен характер клеточных проли­фераций и разрастаний.

Первая систематизированная классификация лейкозов крупного рогатого скота была разработана Э. Визнером (1961), который ука­зывал, что при лейкозе в зависимости от места его проявления наблю­даются более или менее значительные гиперплазии в той или другой гемопоэтической системе, так что в одних случаях он определяется как лимфатическая лейкемия, лимфаденоз или лимфоидно-клеточный ретикулез, а в других — как миелогенная лейкемия или миелоз. К группе лейкозов автор причисляет также другие лейкемиеподобные заболева­нии с опухолевидными разрастаниями тканей в отдельных лимфоузлахили в костном мозге, вызывающие злокачественные инфильтраты в окружающих тканях.

Международная гистологическая классификация опухолей домаш­них животных (ВОЗ, 1975) была разработана для шести видов живот­ных (крупный рогатый скот, кошки, собаки, свиньи, овцы, лошади) и состояла из трех основных групп: лимфоидные новообразования, миелоидные новообразования и тучноклеточные опухоли, каждая из ко­торых включала в себя большое число форм. Учитывая значительное сходство опухолей кроветворной ткани у человека и животных, в ней была использована в основном номенклатура, принятая ВОЗ для клас­сификации опухолей человека. Однако еще далеко не все формы опу­холей, указанные в данной классификации, установлены у животных или у каждого их вида.

Данная классификация не могла быть стабильной, так как после­дующее углубленное изучение этого заболевания может служить пред­посылкой для ее уточнения и совершенствования. С учетом происхо­дящих изменений в медицинской гематологии в понимании нормаль­ного кроветворения А. И. Воробьевым и М. Д. Бриллиант (1976) была создана новая классификация лейкозов человека, основанная на мор­фологическом, цито- и гистохимическом методах исследований. Одна­ко на данном этапе наших знаний более детализированная, с описанием многочисленных форм и вариантов гемобластозов классификация А. И. Воробьева и М. Д. Бриллиант не приемлема для использования в ветеринарной практике.

В настоящее время широкое применение получила ранее разработан­ная Т. П. Кудрявцевой (1967, 1974) классификация гемобластозов живот­ных, которая была усовершенствована с учетом накопленного фактичес­кого материала и произошедших изменений в понимании нормального кроветворения (Кудрявцева, Смирнова, 1985). По характеру и месту локализации опухолевых разрастаний, а также по морфологии и принад­лежности к определенным росткам гемопоэза пролиферирующих клеток гемобластозы были подразделены па две группы:

лейкозы — гемобластозы с системным поражением органов кро­ветворения и вовлечением в патологический процесс костного мозга. Они включают в себя лимфоидный (лимфоцитарный, пролимфоцитарный, лимфобластный варианты), миелоидный, недифференцирован­ный, неклассифицированный (гемоцитобластоз) лейкозы, злокачест­венный гистоцитоз;

гематосаркомы — опухолевые гемобластозы, сопровождаю­щиеся опухолевым ростом, первично проявляющимся в лимфоидной ткани. К ним относятся лимфосаркома (лимфоцитарный, пролимфоцитарный, лпмфобластный, лимфоплазмоцитарный, склерозирующий варианты) с диффузным характером роста, макрофолликулярная лимфобластома (узловой вариант), лимфогрануломатоз, ретикулосаркома.

В основу классификации гемобластозов могут быть положены и другие признаки, позволяющие отличить одну форму от другой. Так, в зависимости от характера клеточной пролиферации, степени транс­формации кроветворения и клинического проявления болезни, течение патологического процесса при лейкозе подразделяется на острое, подострое и хроническое. Причем острота болезни определяется не только скоротечностью, но и характеристикой клеток (Кассирскпй, Алексеев, 1970). Чем резче выражена аплазия клеток, тем острее протекает лей­коз. При этом наблюдают тотальную или субтотальную трансформа­цию кроветворения за счет недифференцированных и слабо дифферен­цированных клеток. Образование некоторого количества зрелых лей­коцитов происходит за счет непораженных участков кроветворной ткани. Уменьшение или полное исчезновение зрелых клеток, которые необходимы для защитных и других функций организма, ведет к гибели больного (Попеску, 1965). Подострое течение лейкоза также относится к острым, для которых характерна лишь временная частичная анаплазия исходных клеток кроветворения.

Хронические лейкозы характеризуются медленным течением с сохранением в той или иной степени способности к полной дифферен­циации клеток различных ростков кроветворения, за счет которых и происходит гиперплазия органов. Исключение составляют формы с опухолевыми разрастаниями, при которых обнаруживают молодые атипичные недифференцированные или ретикулярные клетки. Степень аплазии исходных или промежуточных клеток кроветворения служит объективным признаком для дифференциации острых и хронических лейкозов.

Острые лейкозы могут быть недифференцированными, которые обычно не переходят в хронические, а последние, наоборот, при на­растании аплазии могут принимать острое течение.

Довольно широко применяют термины, отражающие количествен­ный состав лейкоцитов в крови. В настоящее время как в медицине, так и в ветеринарии общепризнанно считать состав крови: лейкопеническим — с количеством лейкоцитов в 1 мкл крови до 4 тыс.; алейкемическим —от 4,1 до 10; сублейкемическим — от 10,1 до 40 и лейкемическим —свыше 40 тыс. Реже употребляют термин «гиперлейкемический уровень лейкоцитоза» с количеством лейкоцитов свыше 100 тыс/мкл. Состав крови до некоторой степени может отражать как стадию, так и тяжесть течения лейкозного процесса.

По степени вовлечения в патологический процесс кроветворных и других внутренних органов различают очаговые, локализованные (с поражением до 25% лимфоузлов), значительные (26-75%) и генера­лизованные (свыше 75% лимфоузлов и органов) варианты болезни.

В ветеринарии широкое применение получило подразделение па­тологического процесса па гематологическую (доклиническую) и кли­ническую (опухолевую) формы, хотя они отражают не формы, а стадии болезни.

Отсутствие унифицированной терминологии для обозначения бо­лезни и клеточных элементов создает существенные затруднения в дальнейшем усовершенствовании диагностики и дифференциации форм лейкоза. Отдельные термины употребляются некоторыми авто­рами к разным формам, или одно и то же название имеет множество синонимов. Это приводит к несоответствию данных, приводимых раз­личными авторами, по отношению, как к формам лейкозов, так и к клеточным элементам.

Впервые со времени установления заболевания Р. Вирховым в 1845 г. болезнь была названа лейкемией или белокровием. В 1916 г. П. Kнут и О. Фолькман описали лейкоз у крупного рогатого скота под названием «лимфоцитоматоз», что характеризовало болезнь как опухолевую с по­ражением органов и появлением лимфоцитоза в крови. Широкое рас­пространение получил термин «лимфаденоз» для обозначения лейкоза крупного рогатого скота. Некоторые исследователи использовали этот термин в случаях преимущественного поражения отдельных органов, например лимфаденоз сердца, сычуга, матки и т. д.

По мере накопления научных данных термин «лейкемия», отобра­жающий только количественные изменения в периферической крови, но не сущность патологического процесса, уже не удовлетворял иссле­дователей и был заменен термином «лейкоз», введенным В. Эллерманом (1908) по отношению к лейкемическим заболеваниям кур. В пос­ледующем лейкоз был перенесен в патологию человека Гиршфельдом (1930) и крупного рогатого скота Г. Добберштайном (1934). Вместе с тем во многих странах, еще употребляют различные термины для обозначения лейкозов. Так, в ФРГ применяют термины: лейкемия, лейкемический лимфаденоз и др., во Франции — лимфосаркома, лимфобластосаркома, эндотелиосаркома и др., в Англии и США - лим­фосаркома, лимфобластома, злокачественная лимфома, лимфоцитома и т.д. Наряду с этим на конференции в Филадельфии (США) в 1961 г. был принят единый термин «лейкоз» для обозначения всех форм заболеваний гемопоэтической системы.

За последнее время все большее распространение получает термин «гемобластозы», предложенный Ю. И. Лорие (1971) для обозначения всех форм поражения органов кроветворения. Старый термин «лейко­зы» и новый «гемобластозы» пока находят широкое применение в ветеринарной практике.

Касаясь терминологии клеточных элементов, необходимо отме­тить, что морфологически и тинкториально клетки крови человека и животных имеют большое сходство. Поэтому в своей работе ветери­нарные специалисты придерживаются наиболее распространенной в медицине терминологии.

5. Методы прижизненной диагностики.

Особенности течения лейкоза свидетельствуют о том, что клини­ческим и патологоанатомическим изменениям предшествуют довольно продолжительные нарушения гемопоэза. Заболевание в большинстве своем развивается постепенно и незаметно. В течение нескольких лет общее состояние животного, упитанность, молочная продуктивность и воспроизводительная функция не вызывают подозрения на лейкоз. В этот период в периферической крови обнаруживаются количествен­ные и качественные изменения морфологической картины. В дальней­шем по мере прогрессирования болезни в зависимости от локализации и степени поражения органов появляются разнообразные клинические симптомы.

Длительность бессимптомного течения лейкоза у крупного рога­того скота и многочисленность пораженных животных в этом периоде болезни явились для ветеринарных лейкозологов основанием внести понятия субклинической (гематологической) и клинической (опухоле­вой) стадии лейкоза.

Соответственно этому и были разработаны гематологический и клинический методы диагностики болезни. В последующем был раз­работан и цитоморфологический метод, основанный на качественных изменениях клеточных элементов крови и кроветворных органов.

Гематологический метод. Периферическая кровь отражает почти все патологические процессы, протекающие в организме явно или скрыто. Поэтому морфологическое исследование крови играет боль­шую роль при постановке диагноза и ведущую роль при заболеваниях кроветворной системы. Еще в 1954 г. Р. Гётце и соавторы установили, что при лейкозе крупного рогатого скота увеличение количества лей­коцитов в крови в большинстве своем происходит за счет лимфоцитоподобных клеток (мононуклеаров). На основании этого ими была создана схема упрощенной диагностики лейкоза, названная «лейкозным ключом» Гётце. Сущность ее заключалась в оценке двух показа­телей белой крови (количества лейкоцитов в 1 мкл крови и процента лимфоцитов в лейкоцитарной формуле). Животные в зависимости от этих показателей крови и возраста подразделялись на гематологически отрицательные, подозрительные и положительные на лейкоз.

В последующем были внесены соответствующие коррективы для усовершенствования гематологического метода диагностики. Так, Г. Бендиксен (I960) и Г. Винквист (1961) предложили диагностировать лейкоз по абсолютному количеству лимфоцитов в 1 мкл крови. При этом для пяти возрастных групп животных предусматривалось опре­деленное количество лимфоцитов, характерных для здоровых, подо­зрительных и больных лейкозом животных.

Основываясь на принципе подсчета абсолютного количества лим-фоидных клеток в 1 мкл крови, во многих странах мира были созданы свои «лейкозные ключи»: геттингенский, кильский (ФРГ, 1965, 1967), чешский (1970), вустерхаузенский (1970) и др. В 1965 г. был разработан отечественный «лейкозный ключ», который подвергался неоднократ­ному совершенствованию (1969, 1973 и 1984).

Простота, доступность в производственных условиях и сравнитель­ная достоверность количественного гематологического метода диа­гностики лейкоза были отмечены многими исследователями (Визнер, 1963; Румянцев, 1972; Симонян, 1975, и др.). А. Толле (1965) пишет, что ему неизвестно ни одно заболевание, при котором наблюдался бы постоянный лимфоцитоз. При этом, указывает автор, лимфоцитоз должен длиться более 6 мес. Однако при работе с больными лейкозом животными не всегда находили соответствия между гематологически­ми и клинико-патанатомическими изменениями. Исходя из этого, дру­гие исследователи допускали наличие повышенного количества лей­коцитов в крови при всевозможных физиологических и других пато­логических состояниях организма.

Гематологические исследования десятков тысяч голов крупного рогатого скота показали, что наиболее вариабельными яв­ляются показатели красной крови, т. с. количество эритроцитов и содержание гемоглобина в 1 мкл крови, которые не имеют диагнос­тического значения при лейкозе. Количество лейкоцитов и процентное содержание белых кровяных телец обладают в большинстве своем определенным постоянством состава. В ряде случаев они подвергаются незначительным количественным изменениям, обусловленным теми или иными функциональными состояниями организма. Однако эти изменения не стабильны, обратимы и при повторных исследованиях через 1—5 мес исчезают. Сравнительно значимые изменения в пока­зателях белой крови наблюдаются в связи с возрастом животных, что находит отражение в «лейкозном ключе» (табл. 1).

Таб. 1. Модифицированный отечественный «лейкозный ключ»

Если количество лейкоцитов у животных будет ниже числа, ука­занного во второй графе таблицы 1, то результат исследований на лейкоз считают отрицательным, если выше, то готовят мазки крови и подсчитывают лейкоцитарную формулу. Путем умножения количе­ства лейкоцитов в 1 мкл крови на процент лимфоцитов в лейкоформуле определяют абсолютное содержание лимфоидных клеток в I мкл крови. Если абсолютное количество лимфоцитов будет в пределах, указанных в третьей графе, животное считается подозрительным в заболевании лейкозом, а показатели четвертой графы характерны для положительных, т.е. больных лейкозом, животных.

Животных, подозреваемых в заболевании лейкозом, подвергают двух-трехкратным исследованиям с интервалом между ними 30 дней. Если при втором и третьем дополнительных исследованиях будут получены отрицательные результаты, таких животных признают здо­ровыми, а при установлении изменений в крови, характерных для больных или подозреваемых в заболевании, животных считают боль­ными.

При гематосаркомах и значительном опухолевом поражении ор­ганов лимфоидной ткани замедляются, а затем и полностью прекра­щаются лимфоцитообразование и поступление их в периферическую кровь. Поэтому в конце болезни сублейкемический уровень лейкоци­тоза может снизиться до алейкемического уровня, лимфоцитоз сменя­ется относительной нейтрофилией. При этом в мазках крови обнару­живают единичные опухолевые клетки.

Высокий уровень лейкоцитов в крови в известной степени указывает на интенсивность течения патологического процесса. Вместе с тем при многообразии форм болезни содержание лейкоцитов не всегда отражает характер поражений кроветворных органов. В связи с этим Э. Попеску (1965) приводит удачное сравнение лейкозного процесса с айсбергом. Автор считает, что по величине поверхности айсберга, находящейся над уровнем океана, нельзя судить о всей его огромной массе, скрытой под водой. Кроме того, существуют айсберги, которые не показываются над поверхностью воды. Последнее относится к лейкозу с алейкемическим составом крови, когда количеств лейкоци­тов не выходит за пределы нормы.Таким образом, гематологический метод («лейкозный ключ») пока является сравнительно достоверным методом прижизненной диагнос­тики на различных стадиях его развития.

Клинический метод диагностики. Симптомокомплекс при лейкозе крупного рогатого скота обусловлен функциональными нарушениями и морфологическими изменениями в органах и тканях кроветворной и негемопоэтической системы. Характер клинических симптомов за­висит от опухолевого поражения той или иной системы органов, а полнота их проявления — от стадии течения лейкозного процесса. В предлейкозном состоянии и начальной стадии болезни клинические симптомы обычно отсутствуют при сохраненной продуктивности и воспроизводительной функции животного. Первые клинические при­знаки появляются в развернутой стадии лейкоза и прогрессируют по мере дальнейшего развития лейкоза. Переход гематологической (субклинической) стадии в клиническую часто происходит после отела, при интоксикации, присоединении вторичной инфекции и т. д.

Помимо органов кроветворения часто в патологический процесс вовлекаются другие внутренние органы, не имеющие непосредствен­ного отношения к кроветворению. Поэтому клинические симптомы подразделяются на специфические, характеризующие лейкоз, и неспецифические, отображающие функциональное нарушение той или иной системы органов вследствие их опухолевых поражений.

Неспецифические клинические симптомы представляют собой расстройства общего характера, которые могут наблюдаться при многих болезнях. Они не отражают особенностей клиники лейкоза и поэтому не имеют решающего значения. Вместе с тем эти симп­томы в сочетании с показателями крови могут быть использованы в диагностических целях и при определении состояния лейкозного процесса.

Неспецифические симптомы чаще всего выражаются в ухудшении общего состояния животного, плохом усвоении кормов, отсутствии аппетита, снижении удоя, быстрой утомляемости, недомогании и прогрессирующем исхудании. При поражении желудочно-кишечного трак­та наблюдают расстройства пищеварения (диарея, часто профузного характера, запоры, атония или тимпания преджелудков), ослабление сердечной деятельности, цианоз и желтушность слизистых оболочек, нарушение дыхания, отеки в области подгрудка, живота, вымени и подчелюстного пространства. При сдавливании нервных стволов ко­нечностей пли прорастании лейкозной опухоли в спинномозговой канал отмечаются хромота на одну или обе задние конечности и слабость, животное с трудом встает или вообще не поднимается. Поражение мочевого пузыря или преддверия влагалища вызывает затруднение выделения мочи, а при поражении матки отмечаются аборты и яловость. Опухоли в половых путях часто препятствуют развитию плода или нормальному отелу. В 5% случаев наблюдаются увеличение одной или нескольких долей вымени (сначала без наруше­ния лактации), инфильтрация подкожной клетчатки вымени.

Специфические (патогномоничные) клинические симптомы выражаются в увеличении поверхностных (предпопаточных, околоуш­ных, подчелюстных, надколенных, иадвыменных и др.) и доступных ректальному исследованию внутренних лимфатических узлов, селезен­ки и печени, в появлении опухолевых разрастаний в различных частях тела, органах и орбитах глаз. Последние обусловливают нередко экзофталъмию с нагноением глазного яблока. Довольно часто наблюдается последовательное поражение лимфатических узлов, поэтому раз­меры их варьируют от грецкого ореха до детской головы. Одновре­менное и равномерное увеличение двух симметрично расположенных лимфоузлов отмечается довольно редко. Обычно они увеличиваются вначале с одной стороны, а затем—с другой. При лейкозе нередко обнаруживаются узлы (околоушные, дополнительные надвыменные, шейные и отдельные подкожные, расположенные в различных частях тела), которые в норме не прощупываются. В области голодной ямки, на грудной клетке, подгрудке, ребрах, лопатке прощупываются мелкие подкожные лимфоузлы до голубиного яйца. В неблагополучных по лейкозу хозяйствах их обнаруживают как у больных, так и у гематологически отрицательных на лейкоз коров. Поэтому сами по себе эти мелкие подкожные лимфоузлы могут иметь диагностическое значение только в сочетании с другими клиническими симптомами или харак­терными изменениями в периферической крови.

Увеличенные лимфоузлы без повышенной местной температуры без­болезненны, подвижны, эластичной или плотной консистенции в зависи­мости от характера и стадии патологического процесса в них. При резком увеличении вследствие растяжения капсулы они становятся безболезнен­ными. При поражении нескольких рядом расположенных лимфоузлов они могут спаиваться между собой или с окружающими тканями, образуя конгломерат. При этом теряются их подвижность и ровная поверхность. Характер и степень поражения лимфоузлов бывают различными в зави­симости от формы заболевания. Различают три формы опухолевого поражения животных: системное (генерализованное) увеличение лимфа­тических узлов; преимущественное поражение внутренних органов и преимущественное поражение кожи и подкожных лимфоузлов. Генера­лизованное поражение лимфоузлов встречается реже, чем регионарных. Внутренние лимфоузлы поражаются чаще наружных. В этом случае при ректальном исследовании обнаруживают увеличение глубоких паховых лимфоузлов, опухолевые разрастания стенок матки, мочевого пузыря, под крестцовыми и поясничными позвонками — мелкие опухолевые об­разования (увеличенные гемолимфоузлы). Иногда вся тазовая полость бывает заполнена опухолями.

К специфическим клиническим симптомам относится и увеличение селезенки, границы которой легко установить при перкуссии. Степень поражения селезенки зависит от формы болезни. При лимфолейкозе и остром лейкозе селезенка увеличивается в несколько раз, достигая массы 25 кг и размера 100x30x10 см. Сильное увеличение селезенки сопровождается высоким лимфоцитозом в периферической крови, иногда наблюдаются разрыв капсулы и внезапная смерть животного от внутреннего кровотечения. При умеренном увеличении одной лишь селезенки общее состояние животного, продуктивность и воспроизво­дительная функция остаются на долгое время в пределах нормы. Однако последующее вовлечение в процесс лимфатических узлов спо­собствует быстрому прогрессированию болезни и появлению других симптомов.

Лейкоз у крупного рогатого скота протекает в большинстве случаев хронически. Острое и подострое течение болезни наблюдается лишь в 5—10% случаев. Поэтому удельный вес клинических симптомов в диагностике лейкозов невелик.

Наряду с энзоотическим лейкозом крупного рогатого скота отме­чается и лейкоз молодняка с нередким опухолевым поражением зобной железы. При этом наблюдаются затрудненное дыхание, хрипы и сли­зистое течение из носовой полости. Диагноз устанавливают по увели­ченным лимфоузлам. В редких случаях обнаруживают кожную форму лейкоза, описанную Н. Bendixen (1963). На теле животного появляются узелковые припухлости по 2,5 см в диаметре, хорошо заметные на шее, спине, крестце и на бедрах. В течение нескольких недель происходит облысение припухлости и ее поверхность покрывается корочкой, со­стоящей из эпителия и экссудата. Корочки отпадают, облысевшие участки вновь покрываются шерстью. Однако через несколько месяцев после кажущегося выздоровления наступает рецидив с появлением тех же признаков болезни. Происходит инфильтративное поражение внут­ренних органов, и животное погибает.

Таким образом, специфические клинические симптомы, а также опухолевые поражения органов брюшной и тазовой полостей, уста­навливаемые ректальным исследованием, являются патогномоничным диагностическим признаком лейкоза. Неспецифические симптомы, от­ражающие опухолевые поражения органов, только в сочетании с по­казателями крови приобретают диагностическое значение.

Цитоморфологический метод диагностики. Современные методы морфофункциональных исследований, углубленное изучение процес­сов, происходящих на клеточном, субклеточном и молекулярном уров­нях, позволили более четко дифференцировать патологические лейкозные клетки от клеток нормального кроветворения. Вместе с тем клас­сические методы цитоморфологического исследования крови и кроветворных органов не утратили своего научного и практического значения. Эти методы имеют решающее значение для уточнения и подтверждения гематологического диагноза, а также дифференциации различных форм лейкоза. Цитоморфологический метод позволяет ус­тановить характер патологического процесса, протекающего со скрытыми или выраженными клиническими симптомами. Этот метод яв­ляется как бы связывающим звеном между клиническим, гематологи­ческим и патоморфологическим исследованиями. При этом часто пред­ставляется возможным установить начальную стадию болезни, изме­нения в отдельных органах при отсутствии видимых признаков на вскрытии животного.

Цитоморфологический анализ как диагностический метод получил всеобщее признание и широкое распространение в медицине. Доста­точная эффективность и достоверность его позволили уменьшить число ошибочных диагнозов злокачественных опухолей и лейкозов у чело­века.

Изучение лейкоза крупного рогатого скота открыло в ветеринарии возможности глубже и детально заняться вопросами цитоморфологических изменений в органах кроветворения в норме и при патологии. Еще на заре изучения лейкоза сельскохозяйственных животных помимо увеличения количества лейкоцитов в периферической крови обнару­живали незрелые или недифференцированные клетки, названные лимфоидоцитами, ридеровскими или лейкозными клетками (Knut, Volkmann, 1916; Du Toit, 1920).

Выявление в крови патологических клеток и их значение при диагностике лейкоза крупного рогатого скота в дальнейшем отмечали многие исследователи. Под патологическими, опухолевыми и моло­дыми клетками авторы подразумевали недифференцированные или малодифференцированные клетки гемопоэза различной степени зре­лости, всевозможные клетки атипичной морфологии, ридеровские и двуядерные формы лимфоцитов, крупные многоядерные клетки и др.

Другая группа исследователей — сторонники количественного ме­тода диагностики лейкоза («лейкозных ключей») не придавали особого значения атипичным формам лимфоцитов или другим клеточным эле­ментам, обнаруживаемым в крови больных лейкозом животных. Все эти клетки вместе с лимфоцитами под одним объединенным названием «мононуклеары» использовали для оценки болезни по «лейкозному ключу». Между тем выявление в крови молодых или патологических клеток не только подтверждает гематологический количественный метод диагностики лейкоза, но и в некоторых случаях позволяет дифференцировать различные формы болезни. По обнаруживанию в крови у теленка плазматических клеток была установлена плазмоцитома (Redini, Romanelli, 1956), базофильных лейкоцитов —тучноклеточный ретикулез (Trautwein, Stober, 1967), моноцитоподобных клеток — моноцитарный лейкоз (Miura, Oshima, 1967).

При обнаружении в крови свыше 3% малодифференцированных или атипичных клеток животное независимо от абсолютного содер­жания в крови лейкоцитов, в том числе лимфоцитов, должно рассмат­риваться как подозрительное по заболеванию лейкозом. В крови здоровых и больных животных помимо типичных лимфоцитов обна­руживаются атипичные, двуядерные и ридеровские формы лимфоци­тов, плазматические и другие формы тканевых клеток. Их количество в лейкоцитарной формуле у здоровых животных обыч­но не превышает 1—2%. Атипичность патологических, так называемых опухолевых клеток проявляется в необычном строении и форме клеток, а также ядер, в их размере, способе размножения, соотношении ядра и цитоплазмы, в потере способности клеток к дифференциации, появ­лении их в местах, где в норме не обнаруживаются, и т. д.

Чтобы избежать ошибок при дифференциации клеток и для правиль­ной интерпретации патоморфологических изменений, все клеточные элементы крови и кроветворных органов, встречаемые как у здоровых, так и у больных лейкозом животных, в зависимости от степени зре­лости, морфологической структуры и принадлежности к кровяным или тканевым элементам были подразделены на четыре группы.

К первой группе отнесены зрелые, закончившие дифферен­циацию клетки крови — базофилы, эозинофилы, зрелые нейтрофилы, лимфоциты и моноциты.

Лимфоциты (малые, средние и большие) у здоровых и больных лейкозом животных по морфологии идентичны, диаметр составляет 5—9 мкм

Малые лимфоциты строго круглые, с плотным хроматином ядра и голубой цитоплазмой, охватывающей ядро на 1/3-1/2 в виде полумесяца. Средние лимфоциты также круглые, хро­матин ядра с хорошо заметной тигроидностью образует темные глыбки и просветленные участки. Цитоплазма охватывает ядро полностью или па ²/₃, расширяясь с одного конца клетки на 1 —2 мкм. Зачастую цитоплазма светлого или голубого цвета, по периферии темнее, а к ядру, просветляясь, образует перинуклеарную зону. Большие лимфо­циты легко теряют свою округлость от технических погрешностей при приготовлении мазка. Хроматин ядра имеет сравнительно светлую окраску, тигроидность слабо выражена. Цитоплазма светлого, часто голубого цвета охватывает ядро полностью с расширением на одном из полюсов на 1—2 мкм.

В лейкоцитарной формуле наибольший удельный вес из общего количества лимфоцитов имеют средние лимфоциты (40—60%), затем малые (30—40%) и большие (10—20%). Незначительное изменение процентного соотношения их в лейкоцитарной формуле может быть обусловлено методами подсчета клеток в мазке и индивидуальными особенностями животных. Существенные изменения отмечают при прогрессировании болезни с превалированием числа больших и сред­них лимфоцитов в результате снижения содержания малых.

В крови животных встречаются широкоцитоплазменные лимфоци­ты (до 2—5%). Диаметр их составляет 8—10 мкм за счет относительно широкой (2—4 мкм) цитоплазмы светло-голубого цвета, содержащей иногда азурофильные зерна.

В диагностике лейкоза имеет значение не морфология клеток пер­вой группы, а увеличение абсолютного числа лимфоидных клеток в 1 мкл крови.

Ко второй группе отнесены ридеровские и двуядерные формы лимфоцитов, макрофаги, клетки раздражения, эндотелия сосу­дов и всевозможные тканевые элементы, которые могут попасть в кровяное русло в незначительном количестве. Эти клетки не отражают патологический процесс, а, скорее, сами являются патологическими при нормальной жизнедеятельности организма. В крови здоровых животных их не более 2—5%.

Ридеровские формы лимфоцитов имеют ядра неправильной формы с бухтообразным вдавлением с одной стороны. Двуядерные клетки — это формы амитотического деления клеток. Ядра иногда соединены между собой тонкой перемычкой в одной цитоплазме. Оба вида клеток имеют аналогичную со зрелыми клетками величину и структуру хро­матина ядра.

Лимфоцитоподобные клетки имеют биполярно вытянутую цито­плазму с бахромчатыми краями или несут следы разрыва от синцитиальной связи. Некоторые из них имеют веретенообразную форму с более нежным строением ядерного хроматина, чем у зрелых лимфо­цитов.

Макрофаги имеют различную форму: вытянутую, хвостатую, при­чудливую и др. Ядро узкое, извитое или овальное, оттесненное к краю широкой цитоплазмы, которая обычно неправильной формы, содер­жит нуклеоли, зерна пигмента, остатки клеток и другие включения.

Плазмоциты — лимфоидные клетки с цитоплазмой, окрашиваю­щейся в интенсивно-синий цвет. Хроматин ядер собран в грубые глыбки, цитоплазма объемистая.

В периферическую кровь могут попасть также клетки сосудистого эндотелия с овальным пли удлиненным ядром и как бы разорванной цитоплазмой. Наличие единичных клеток второй группы в крови — также нехарактерный признак лейкоза.

К третьей группе отнесены родоначальные и малодифференцированные клетки кроветворных органов, количество которых вследствие задержки или замедления дальнейшей дифференциации в местах их образования увеличивается и они попадают в периферическую кровь. При лейкозах крупного рогатого скота в большинстве своем подвергаются изменениям родоначальные клетки, пролимфоциты и лимфобласты.

Пролимфоциты — переходная форма между зрелыми лимфоцита­ми и лимфобластами, почти всегда обнаруживают в крови больных животных, начиная с начальной стадии. Средний диаметр клеток составляет 10 мкм, однако может колебаться от 9 до 11 мкм. Для них характеры слабо выраженная пятнистость хроматина ядра, светлые тона. В ядрах некоторых пролимфоцитов видны слабозаметные нуклеоли голубого цвета. Светло-голубая цитоплазма шириной 1—2 мкм полностью окружает ядро

Диаметр лимфобластов 11—13 мкм. Они округлой формы, со срав­нительно рыхлым хроматином ядра. При доброкачественном течении болезни лимфобласты обычно большие, со слабо выраженной тигроидностыо хроматина ядра и без нуклеолей. При обострении процесса увеличивается количество клеток с нуклеолями. Цитоплазма широкая, голубого, реже светло-базофильного цвета, ядро расположено эксцентрично. Встречаются лимфобласты с узкой светло-синей цитоплазмой и центрально расположенным сравнительно большим ядром.

Родоначальные, недифференцированные клетки встречаются в макро-, мезо- и микрогенерациях

Макрогенерации имеют размер 11 —13 мкм в диаметре, а мезогенерации — 9—10 мкм. Оба вида округлой формы, с равномерно расположенным нежно-сетчатым хроматином ядра. Нуклеоли окрашиваются в голубой цвет, однако их обнаруживают не во всех клетках. Цитоплазма узкая или средней ширины, светло-голубого цвета. Иногда клетки несколько теряют округлость формы при сохранении нежно-сетчатой структуры ядра. Большой интерес представляет микрогенерация, или так называемые по старой терминологии микрогемоцитобласты. Эта форма клеток при лейкозе крупного рогатого скота встречается чаще, чем две первые. Дифференциация их от зрелого лимфоцита представляет некоторые трудности. Микрогемоцитобласты имеют размер среднего лимфоцита (7—8 мкм), формы клетки и ядра строго круглые. Хроматин ядра имеет равномерную, грубосетчатую или извилисто-петлистую струк­туру. В ядрах по одному, реже по два ядрышка.

Клетки этой группы в норме или при лейкозе сохраняют присущую им морфологическую структуру. По отношению к этой группе клеток и относится утверждение некоторых исследователей о том, что лейкозные или лейкемические клетки невозможно отличить от нормаль­ных, т. е. невозможно в родоначальных кровяных клетках по их мор­фологической структуре определить их злокачественность. В данном случае критерий злокачественности — сам лейкозный процесс, опре­деляемый по увеличенному количеству клеток как в местах их обра­зования, так и вне этих мест.

К четвертой группе отнесены различные клетки атипичной морфологии, которых не обнаруживают в кроветворных органах здо­ровых животных. Такие клетки отличаются многообразием формы, величины и морфологии. Они не описаны в литературе и отсутствуют в числе кроветворных клеток. Подобные «чужеродные» пли видоиз­мененные клетки, появляющиеся в крови и кроветворных органах, можно назвать опухолевыми или злокачественными, так как они тож­дественны клеткам, участвующим в образовании опухоли. Сюда от­носятся также стромальные, т. е. ретикулярные, клетки, отличающиеся большим разнообразием форм, размеров и морфологии. Подобные атипичные клетки обнаруживают обычно при поражении ретикуляр­ной стромы кроветворных органов, при гематосаркомах с опухолевы­ми поражениями внутренних органов. Наблюдаются также атипичные моноциты, ретикулоэндотелиальные клетки и формы извращенной трансформации ретикулярной клетки.

Опухолевые клетки вследствие своеобразия роста, физиологических и биохимических особенностей должны отличаться по морфологии от клеток исходной (нормальной) ткани. При поражении ретикулярной стромы органа или при его опухолевом разрастании клетки видоиз­меняются, становятся атипичными, отличительными по морфологии от клетки этого же органа в нормальном состоянии. Их распознают по величине, форме, структуре и другим признакам

Величина клеток чрезвычайно разнообразна. Диаметр их варьирует в пределах 5—18 мкм, а диаметр клеток Березовского — Штернберга и гигантских ретикулярных клеток достигает 20—30 мкм

Соответственно размерам клеток бывают увеличены и размеры ядер. Большие ядра (свыше 7 мкм) характеры для недифференцированных злокачественных клеток.

Соотношение размеров ядра и цитоплазмы не всегда одинаково. У одних клеток громадное ядро окружено узким ободком цитоплазмы, а у других — ширина цитоплазмы в 1 —1,5 раза превышает диаметр ядра. Ядро в цитоплазме расположено центрально или эксцентрично. Цитоплазма иногда вытянута, со следами разрыва.

Форма клеток, как и ядер, может быть округлой, овальной, поли­гональной, вытянутой, бобовидной и самых причудливых очертаний, которые не поддаются описанию. Такие причудливые формы клетки, не похожие ни на одну из клеток нормальной ткани здорового орга­низма, являются патогномоничными для опухолевого процесса. Ряд исследователей считают, что обнаружение единичных экземпляров таких клеток в периферической крови или пунктатах кроветворных органов может пролить свет на характер патологического процесса, a в комплексе с другими исследованиями и на возможность установ­ления диагноза. Хроматин ядра клеток малой и средней величины имеет плотное тигроидное строение, окрашивается более интенсивно. В больших клетках ядро часто содержит меньше хроматина, по своей структуре (равномерной, сетчатой) напоминает таковую родоначальных кровя­ных клеток, окрашено менее интенсивно — в слабо-фиолетовый цвет. В ядрах клеток обнаруживают одно большое или два — пять мелких ядрышек. Однако их наличие и количество не являются обязательным признаком опухолевых клеток.

Цитоплазма клеток по величине и по форме также разнообразна. Она бывает округлой, вытянутой и часто неправильной формы, иногда с вакуолизацией. Цвет ее от светлой (бесцветной), голубой до интенсивно-синей. В цитоплазме некоторых клеток обнаруживают различ­ные включения, иногда зернистость промиелоцитарного типа, но более интенсивного цвета. В некоторых случаях клетки имеют вид «голых» ядер, без выраженной цитоплазмы.

Таким образом, при многообразных формах гемобластозов круп­ного рогатого скота в крови и органах кроветворения дифференцируют различные клеточные элементы. В зависимости от преобладания кле­ток той или иной группы с учетом других клинических симптомов устанавливают характер патологических изменений, подтверждают диагноз на лейкоз и дифференцируют формы болезни.

Появление в крови молодых и атипичных клеток и увеличение их количества зависят от степени и характера поражения кроветворных органов. Поэтому цитоморфологические исследования костного мозга, селезенки и лимфатических узлов значительно расширяют диагности­ческие возможности различных форм лейкозов. Цитоморфологические исследования кроветворных органов позволяют глубже понимать процессы, протекающие в орга­низме, получать такие данные, которые не выявляются другими мето­дами исследования.

Для ранней стадии всех форм лейкоза диагностическое значение приобретает повышенное количество клеток первой труппы и, в частности, лимфоцитов. Увеличение количества лимфоцитов в пе­риферической крови не вызывает сомнения, что какая-то часть из них уже является лейкемической по своей природе. Поэтому необ­ходимо установить возможность наличия морфологических отличий между лимфоидными элементами крови здоровых и больных лей­козом животных.

6. Стадии течения лейкозного процесса.

Как в медицинской, так и в ветеринарной практике клинико-гематологический и цитоморфологический методы исследований пока ос­таются сравнительно достоверными для прижизненной диагностики гемобластозов. Вместе с тем диагноз по картине крови не всегда подтверждается патоморфологическим анализом, что объясняется своеобразным течением данного заболевания. Раннее проявление бо­лезни выражается в незначительных изменениях морфологической кар­тины периферической крови, которые появляются незаметно и прогрессируют, не оказывая влияния на общее состояние животного. Диапазон изменений, т. е. уровень лейкоцитоза и лимфоцитоза в крови, очень широк. Исходя из этого, необходимо знать, при каких изменениях крови можно поставить безупречный диагноз на лейкоз, а при каких - подозревать лейкоз и вести дифференциальную диа­гностику с лейкемоидными реакциями.

Многолетнее изучение динамики развития лейкозного процесса методами комплексных клинико-гематологических и цитоморфологических исследований с последующим патоморфологическим анализом материала позволило установить стадийность течения болезни. На основании результатов наших исследований и литературных данных течение лейкозного процесса у крупного рогатого скота по аналогии с таковым у людей подразделили на следующие пять периодов, или стадий:

а) инкубационная, или латентная;

б) предлейкозная (стадия или состояние);

в) начальная (доклиническая, гематологическая);

г) развернутая (клинико-гематологическая);

д) конечная (клинико-патанатомическая).

Эта стадии при неодинаковой их выраженности свойственны всем формам лейкоза. Переход одной стадии в другую не всегда определя­ется временем или уровнем лейкоцитоза в крови, хотя последнее бес­спорно свидетельствует о прогрессировании лейкозного процесса, а следовательно, о переходе из одной стадии к другую. Прогрессирование лейкозного процесса и переход из одной стадии в другую возможны и при алейкемическом и сублейкемическом составе крови. При этом критерием развития заболевания являются цитоморфологические изменения в крови и кроветворных органах, появление клинических симптомов или патологоанатомических признаков лейкоза.

а. Инкубационная, или скрытая, стадия. Лейкоз является заболеванием кроветворных органов, а лейкоцитоз и лимфоцитоз в крови — первый признак прижизненного проявления болезни. Поэтому период с начала поражения кроветворного органа или образования первых лейкемических клеток до их обнаружения существующими методами исследования можно относить к скрытой стадии. Ранее первые гема­тологические изменения у животных были установлены в срок от 112 до 530 дней после заражения их клеточным материалом от больных лейкозом животных. После обнаружения вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС) период с момента заражения животного и до гематологического проявления болезни относят к инкубационной стадии. Причем, если время с момента внедрения вируса до образова­ния антител к ВЛ КРС, определяемых в реакции иммунодиффузии (РИД), составляет 1—1,5 мес, установить точный срок проявления лейкоза у инфицированных животных невозможно. Переход инкуба­ционной стадии в гематологическую у одних животных происходит в течение нескольких месяцев, а у других — многих лет. Видимо, это зависит от вирулентности инфекционного агента и иммунологического состояния организма.

б. Предлейкозное состояние. Многочисленные наблюдения за больными лейкозом в динамике заболевания и за лицами, пережившими
атомные взрывы или подвергавшимися действию ионизирующих об­лучений, опыты по воспроизведению лейкоза, проведенные на живот­ных, показали, что задолго до появления не только клинических симп­томов, но и лейкемической картины крови в организме обнаружива­ются незначительные и нестойкие клеточные и субклеточные изменения, напоминающие лейкоз. Такие изменения названы предлейкозным состоянием или предлейкозом.

Поголовное гематологическое исследование крупного рогатого скота неблагополучных по лейкозу стад показало, что при каждом исследовании выявляется определенное количество животных с отно­сительным и абсолютным лимфоцитозом в крови. Причем у одних животных эти изменения при повторных исследованиях прогрессивно нарастают, а у других, наоборот, снижаются до нормы.

Ретроспективный анализ гемограмм одной тысячи голов крупного рогатого скота с относительным и незначительно абсолютным лим­фоцитозом в крови при первом исследовании показал, что у 43% из них количественные показатели крови снизились до пределов нормы в течение 1—5 мес, у 26,3% количество лейкоцитов и лимфоцитов в течение 1—2 лет варьировало в пределах, характерных для здоровых, подозрительных и реже положительных на лейкоз животных по «лейкозному ключу», у 30,7% было отмечено последовательное нарастание количественных показателей крови до сублейкемического или лейкемического уровня с появлением клинических симптомов или патологоанатомических изменений, характерных для лейкоза. Отсюда следу­ет, что относительный и незначительно абсолютный лимфоцитоз в крови у 30,7% животных был характерным для предлейкозного состо­яния, но не строго специфичным. В любом стаде подобные изменения в крови могут быть обусловлены также всевозможными физиологи­ческими и патологическими состояниями организма. Они в отличие от предлейкоза не стабильны и в течение 1—5 мес приходят в пределы нормы. В группе у 26,3% животных вариабельность показателей крови находилась в прямой зависимости от продолжительности воздействия лейкозогенного фактора, защитных сил организма и предрасположен­ности данного индивида к лейкозу. Поэтому у одних животных предлейкоз «затухает» (побеждает организм), у других - повышенные по­казатели крови стабилизируются на лейкозоподозрительном уровне в течение долгого времени (компенсированное состояние), а у третьих — длительное компенсированное состояние предлейкоза проявляет тен­денцию к прогрессированию в виде дальнейшего нарастания лимфо­цитоза в крови. На основании проведенного анализа мы можем отме­тить, что для предлейкозного состояния крупного рогатого скота характерны относительный и абсолютный (до 14 тыс/мкл) лимфоцитоз в крови при отсутствии других патологических изменений. Этот уро­вень лимфоцитоза характерен по «лейкозному ключу» для подозри­тельных в заболевании лейкозом и дифференцируется от лейкемоидных реакций своей стабильностью в течение не менее 6 мес или дальнейшим прогрессированием.

в. Начальная (доклиническая, гематологическая) стадия. Начальная стадия лейкозного процесса, как и предлейкозное состояние, характе­ризуется отсутствием клинических симптомов болезни, но более по­стоянными изменениями количественного и качественного состава пе­риферической крови в виде абсолютного лимфоцитоза и наличием единичных малодифференцированных клеток. Количество лейкоцитов при этом находится в пределах 15—40 тыс/мкл.

Уровень лейкоцитоза зависит от формы и характера течения про­цесса, от продолжительности заболевания и индивидуальных особен­ностей животного. В более раннем периоде отмечается умеренное увеличение количества лейкоцитов до 15—20 тыс/мкл, а в последующем число их нарастает до 25—35 тыс. и стабилизируется на этом уровне. В неблагополучном по лейкозу стаде число животных с начальной стадией составляет 50—60% и более. Болезнь в этой стадии может продолжаться до 6—8 лет, зачастую без тенденции к прогрессированию, т. е. появлению клинических или патологоанатомических признаков. Общее состояние, упитанность и молочная продуктив­ность животного не вызывают подозрений на лейкоз.

Прогрессирование лейкозного процесса у больных в начальной стадии болезни выражается в дальнейшем повышении количества лей­коцитов до лейкемического уровня. Причем переход от сублейкемического уровня лейкоцитоза к лейкемическому не всегда зависит от продолжительности заболевания. Переход болезни из одной стадии в другую наблюдали у животных разных возрастов, при неодинаковых продолжительности болезни и уровне лейкоцитоза. Обострение про­цесса часто происходит при аборте или отеле животного и при при­соединении вторичной инфекции, воспалительных процессов. В на­чальной стадии наиболее часто отмечаются спонтанные ремиссии и рецидивы болезни.

Изменения костного мозга в начальной стадии лейкозного процесса выражаются в умеренном подавлении эритробластического или миелобластического ростков и в увеличении количества лимфоцитов, пролимфоцитов, лимфобластов или атипичных клеток.

В лимфатических узлах (пораженных) обнаруживали умеренное омоложение клеток, что является признаком прогрессирования лей­козного процесса.

г. Развернутая (клинико-гематологическая) стадия. При прогрессировании или обострении лейкозного процесса заболевание из начальной стадии переходит в развернутую, которая характеризу­ется одним или несколькими из перечисленных ниже признаков:

· лейкемической картиной крови (выше 40 тыс. лейкоцитов в 1 мкл);

· увеличением количества молодых, недифференцированных или ати­пичных опухолевых клеток в лейкоцитарной формуле свыше 5% независимо от количества лейкоцитов;

· умеренной или сильной лимфоидной метаплазией костного мозга;

· повышением процента недифференцированных или опухолевых клеток (более 10—20%) в миелограмме, спленограмме, аденограмме или гепатограмме, появлением неспецифических или первых специфических клини­ческих симптомов лейкоза.

В этой стадии диагноз всегда подтверждается патоморфологическим исследованием.

Продолжительность развернутой стадии варьирует от нескольких месяцев до 1—2, реже 3 лет, что зависит от интенсивности прогрессирования или обострения лейкозного процесса. У одних больных клинико-гематологические признаки нарастают медленно, иногда стаби­лизируясь на короткое время, у других процесс развивается бурно. Присоединение какой-либо патологии нелейкозного характера обостряет течение болезни, ускоряя переход ее в терминальную (конечную) стадию.

Установить время перехода одной стадии в другую не всегда уда­ется, особенно при опухолевых поражениях только внутренних орга­нов, без существенных изменении в картине крови. У большей части животных клинико-гематологические, цитоморфологические, патологоанатомические признаки нарастают постепенно, однако лейкозный процесс при этом уже широко распространен в организме. Поэтому случаи ремиссии болезни и снижение количественных показателей крови до нормы в этой стадии сравнительно редки.

У больных животных количество лейкоцитов в крови находится в пределах 40—100 тыс/мкл, изредка может возрастать до 500 тыс. и более. Повышение лейкоцитоза происходит в основном за счет лим­фоцитов и молодых клеток (лимфобластов, пролимфоцитов и др.). Такие изменения в крови характерны для истинных лейкозов. При гематосаркомах количество лейкоцитов часто остается на сублейкемическом уровне или снижается до пределов нормы. В мазках крови обнаруживаются ретикулярные и античные клеточные элементы. Со­держание ретикулярных и других молодых клеток в крови нарастает по мере прогрессирования или обострения лейкозного процесса.

Изменения в красной крови при лейкозе крупного рогатого скота появляются значительно позже, чем в белой. В предлейкозном состо­янии и в начальной стадии количество эритроцитов и содержание гемоглобина в крови остаются в пределах физиологической нормы. В развернутой стадии лейкоза эти показатели снижаются. Интенсивность и степень снижения их зависят от давности лейкозного процесса и характера его течения. Анемия становится постоянным признаком развернутой стадии. Основой ее являются аплазия кроветворения и, в частности, подавление эритробластического ростка костного мозга. Отмечаются значительные цитоморфологические изменения в крове­творных органах, характер которых зависит от формы заболевания.

Таким образом, развернутой стадии лейкоза свойственны разно­образные клинико-гематологические и цитоморфологические измене­ния. От других стадий она отличается лейкемическим составом крови, наличием повышенного числа молодых и недифференцированных кле­ток в крови и кроветворных органах, неспецифическими и умеренно выраженными специфическими клиническими признаками, сравни­тельной непродолжительностью и прогрессирующим течением процес­са.

д. Конечная, или терминальная, стадия (клинико-патанатомическая). Конечную, или клиническую, стадию лейкоза при увеличении поверхностных или доступных ректальному исследованию внутренних лимфоузлов и селезенки, наличии опухоли или пучеглазия (экзофтальм) диагностировать не представляет трудности. В зависимости от лока­лизации и степени распространения патологического процесса в орга­низме появляются разнообразные клинические симптомы и патологические изменения во внутренних органах. Эти признаки, характерные для лейкоза, появляются полно лишь незадолго (за несколько недель, реже месяцев) до гибели животного, поэтому ее называют конечной, или терминальной, стадией. Эта стадия болезни среди всех остальных имеет очень незначительный удельный вес, что можно объяснить малым количеством случаев острого и подострого течения лейкоза у крупного рогатого скота, преждевременным убоем больных животных с хроническим течением, при котором лейкозный процесс не успевает дойти до конечной стадии. Лейкоз может переходить из одной стадии в другую у животных различного возраста, однако установить факто­ры, способствующие этому переходу, в особенности из гематологи­ческой стадии в клиническую (опухолевую), пока не представляется возможным. Клинические или патологоанатомические изменения про­являются преимущественно у высокоудойных коров до или в первые 2 мес после отела, т. е. в период максимального напряжения организма и понижения его устойчивости в связи с глубокой стельностью или усиленной лактацией.

Полнота проявления клинических симптомов зависит от характера течения болезни. Более полно они проявляются при остром и обо­стренном течении лейкоза, при генерализованном поражении лимфа­тических узлов и других органов. При хроническом и подостром течении клинические признаки представлены скудно, часто неспецифическими симптомами, которые развиваются медленно, скрыто, про­являясь полно при обострении процесса. Помимо кроветворных ор­ганов в патологический процесс вовлекаются и другие внутренние органы, функциональное нарушение которых обусловливает появле­ние всевозможных, не характерных для лейкоза клинических симпто­мов.

Конечная стадия лейкоза характеризуется также гематологически­ми и глубокими цитоморфологическими изменениями. Животные могут иметь алейкемический, сублейкемический и лейкемический со­став крови. При переходе лейкозного процесса из развернутой стадии в конечную у одних животных количество лейкоцитов увеличивается до лейкемического уровня, у других остается на сублейкемическом уровне, а у третьих количество лейкоцитов снижается до алейкемического уровня. Сублейкемический и лейкемический состав крови всегда сопровождается лимфоцитозом или наличием малодифференцированных клеток в лейкоформуле. При алейкемических же вариантах наряду с уменьшением ранее повышенного количества лейкоцитов изменяется процентное соотношение клеточных элементов в лейкоцитарной фор­муле. У одних животных последняя характеризуется относительным лимфоцитозом, у других — нейтрофилией, моноцитозом или эозинофилией. Зачастую увеличен процент ретикулярных клеток, так как алейкемическая картина крови наблюдается в основном при гематосаркомах. Конечная стадия характеризовалась более значительными цитоморфологическими изменениями в кроветворных и других пора­женных органах. В зависимости от формы лейкоза, поражения парен­химы или ретикулярной стромы органа наблюдается увеличение ко­личества того или иного вида клеточных элементов.