Качественный химический анализ на пероксидазу и полифенолоксидазу в разных сортах картофеля.
Появление окраски говорит нам о том, что фермент сработал. А интенсивность окраски позволяет судить о количестве продуктов окисления. Если же окраска вообще не появляется, значит, фермент неактивен. Это может случиться в слишком кислой или слишком щелочной среде, или если отсутствуют поставщики кислорода, или в присутствии вредных для ферментов веществ — так называемых ингибиторов ферментов.
В пробирках, где в реакцию вступила перекись водорода, очень быстро наблюдаем изменение цвета от красного до кирпично-красного, там, где присутствовала только вода, изменение цвета происходит, но не столь выраженно и медленнее.
Рис. 4 Действие пероксидазы в растворе гидрохинона и картофельного сока:1- сорт «Беллароза», 2- сорт «Колетте», 3- сорт «Любава», 4- сорт «Маяк» 5- сорт «Родриго»;
Рис. 5 Действие пероксидазы в растворе гидрохинона и картофельного сока с перекисью водорода: 1 - сорт «Беллароза», 2 - сорт «Колетте», 3 - сорт «Любава», 4 - сорт «Маяк» 5 - сорт «Родриго»;
Образующийся хинон имеет цвет от оранжево – красного до темного кирпично-красного цвета. В ряде случаев идет и обильное газообразование, так как идет разрушение перекиси водорода другим ферментом - каталазой. Реакция, протекающая с изменением цвета, может быть выражена с помощью реакции:
или
Рис. 6. Реакции, протекающие в исследуемом растворе [7];
Как можно увидеть на рисунке 4 и 5 цвет отличается, так как в присутствии перекиси водорода ускоряется реакция восстановления гидрохинона до хинона под действием фермента. В пробирках, где цвет изменился не значительно, так же присутствуют ферменты, но гидрохинон окисляется за счет фермента полифенолоксидазы, при этом также образуется перекись водорода, но органического происхождения (рис.6). Она окисляется каталазой, и мы видим на поверхности незначительное образование пузырьков газа (рис.4).
Таким образом, по цвету полученных растворов мы можем заключить, что наибольшее количество определяемых ферментов в картофельном соке сорта «Маяк», чуть менее в сортах «Колетте» и «Любава», а меньше всего в сорте «Беллароза». По полученным данным можно судить об устойчивости сорта к заболеваниям и его иммунном статусе. Сорт «Маяк» наименее восприимчив к заболеваниям, а вот сорт «Беллароза» среди представленных сортов, имеет максимальную устойчивость.