Задание 8. Центромерный индекс (УИРС)
Центромерный индекс (Ic) – это отношение длины короткого плеча ко всей длине хромосомы, выраженное в процентах. Центромерный индекс метацентрических хромосом от 45 до 50 %, субметацентрических хромосом от 25 до 45 %, акроцентрических – меньше или равен 25 %.
Вычислите центромерные индексы Х- и У- хромосом, если известно, что длина Х- хромосомы в среднем 6,8 мкм, длина короткого плеча – 2,6 мкм; длина У- хромосомы – 2,8 мкм, длина короткого плеча – 0,5 мкм.
____________________________________________________________________________________________________________________________
• К какому типу хромосом относятся Х- и У- хромосомы с учетом их центромерного индекса? ___________________________________________
Задание 9. Методические правила кариотипического анализа человека по фотографии метафазной пластинки (УИРС)
Основная задача кариотипического исследования состоит в установлении качественных и количественных отклонений от нормы. Заключение о наличии или отсутствии качественных нарушений хромосом можно сделать только на основании дифференциальной окраски хромосом разными методами с обязательным микрофотографированием аномальных пластинок.
Ознакомьтесь с методическими указаниями кариотипического анализа человека и, пользуясь рисунками 2 и 3, проанализируйте метафазные пластинки хромосом человека (рутинная окраска) (рис. 4 и 5):
1. На метафазной пластинке следует найти крупные метацентрические хромосомы группы А, подсчитать их количество и обозначить каждую хромосому буквой А.
2. Найти крупные субметацентрические хромосомы группы В, обозначить каждую хромосому буквой В и подсчитать их количество.
3. Найти акроцентрические хромосомы группы D (среднего размера), обозначить каждую хромосому буквой D и подсчитать их число.
4. Найти мелкие акроцентрические хромосомы группы G, обозначить каждую хромосому буквой G и подсчитать их число. При этом необходимо учитывать, что У-хромосома по своим параметрам является мелким акроцентриком, поэтому идентифицируется вместе с хромосомами группы G.
5. Найти мелкие метацентрические хромосомы группы F, обозначить каждую хромосому буквой F и подсчитать их число.
6. Найти мелкие субметацентрические хромосомы группы Е, подсчитать их число и обозначить каждую хромосому буквой Е.
7. Оставшиеся средние субметацентрические хромосомы обозначить буквой С, подсчитать их число, учитывая, что Х-хромосома по своим параметрам является субметацентриком, а поэтому идентифицируется вместе с хромосомами группы С.
Проанализируйте метафазную пластинку человека в норме, распределите хромосомы по группам и подсчитайте их число, определите, мужчине или женщине принадлежит кариотип.
| 
|
| Рис. 2. Кариотип мужчины | Рис. 3. Кариотип женщины |
Рис. 4. Метафазная пластинка хромосом 1. Рис. 5. Метафазная пластинка хромосом 2.
Ответьте на вопросы:
• Мужчине или женщине принадлежит исследуемый кариотип (рис. 4, 5)?
• Напишите хромосомную формулу изученного кариотипа человека __________________________________________________________________
• Позволяет ли рутинный метод окраски хромосом индивидуализировать все хромосомы внутри каждой группы? __________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________
• Вычислите центромерный индекс для всех хромосом группы А. Для этого измерьте длину всей хромосомы, длину ее короткого плеча. По центромерному индексу определите номер пары каждой хромосомы группы А.______________________________________________________________
Задание 10. Половой хроматин - Х- и У- хроматин (УИРС)
Х- хроматин (тельце Барра) – это инактивированная и конденсированная одна из двух Х- хромосом соматических интерфазных клеток женщтны. В клетках женского эмбриона она инактивируется примерно на 16-20 день развития. Y- хроматин представляет собой блок гетерохроматина в длинном плече Y - хромосомы и выявляется в интерфазных ядрах соматических леток мужчин.
Препараты полового хроматина можно приготовить, используя клетки слизистой ротовой полости, лейкоцитов, фибробластов кожи и клетки волосяной луковицы, окрашивая их ацетоорсеином или флуоресцентными красителями. Х- хроматин выявляется с внутренней стороны ядра в виде плотной хорошо окрашенной глыбки, имеющей форму треугольника или овала. Клетки мужчины, как правило, без этой глыбки.
Ответьте на вопросы:
• Каков биологический смысл явления гетерохроматизации одной из двух Х- хромосом женского организма у человека и млекопитающих?
____________________________________________________________________________________________________________________________
• Сколько Х- и Y - хроматина выявляется в клетках при следующих кариотипах:
45, ХО (с. Тернера-Шерешевского) ______________________________; 47, ХХY ______________________________________________________,
48, ХХYY _______________________________________, 48,ХХХY (разных вариантах с. Клайнфельтера) ___________________________________,
47, ХХХ (с. трипло-Х) _________________________________________, 48, ХХХХ (с. тетра-Х)? _________________________________________