Ферментативные свойства слюны.
Цель занятия; Исследовать ферментативные свойства слюны, влияние рН и температуры на активность ферментов слюны.
Материал и оборудование; Слюна животных или человека, 1%р-р крахмального клейстера, 1% р-р медного купороса, 0,5% р-р соляной кислоты, р-р Люголя, лакмусовая бумага, водяная баня, термометр, пробирки, пипетки, спиртовка, индикатор метилоранж, дистиллированная вода, 0,01% р-р серной кислоты, стаканчики.
Пронумеровать пять пробирок, заполнить их так, как указано в таблице. Пробирку №5 сразу после заполнения поместить в сосуд со снегом, остальные в водяную баню при температуре 38-40 С. Через 10 минут пробирки вынуть, охладить и содержимое пробирки разделить на две неравные части. С меньшей частью содержимого проделать реакцию на крахмал (прибавить 2-3капли р-ра Люголя), с другой частью пробу Троммера на сахар. Для этого прилить ½ объема 10% р-ра Nа ОН, добавить по каплям 1% р-ра медного купороса до ярко-голубого окрашивания. Содержимое нагреть над пламенем спиртовки. При нагревании синий цвет гидрата окиси меди переходит в желтый цвет гидрата меди, при дальнейшем нагревании желтый цвет переходит в красный – образуется закись меди.
| № | Содержимое пробирок | Проба с р-ром Люголя на крахмал |
| 1 | Крахмальный клейстер 2мл+2мл слюны | Оранжевое окрашивание |
| 2 | Крахмальный клейстер 2мл+1мл.подкисл. слюны | Оранжевое окрашивание |
| 3 | Крахмальный клейстер 2мл+1мл. прокип. слюны | Оранжевое окрашивание |
| 4 | Сырой крахмал 2мл.+1мл.слюны | Синее окрашивание |
| 5 | Крахмальный клейстер 2мл.+2мл.слюны | Оранжевое окрашивание |
Ферменты слюны – амилаза (птиалин) и мальтаза действуют на углеводы (крахмал) и значительно ускоряют разложение его до глюкозы.
Слюна не способна расщепить крахмал при низкой температуре, для этого потребовалось нагревание.
Синее окрашивание же указывает на то, что крахмал расщеплен не был.
16.06.2023
Определение кислотности рН желудочного сока.
Цель занятия: определить значение соляной кислоты в процессе пищеварения, провести качественное определение желудочного сока; определить свободную и связанную соляную кислоту.
Материал и оборудование: желудочный сок, фенолфталеин, метилоранж, 0,1% р-р NаОН, лакмусовая бумажка, колбочки, стаканчики, пипетки.
Для качественного определения реакции опустить синюю лакмусовую бумажку в желудочный сок.
Нейтральный желудочный сок – зеленый цвет (рН 7)
Желудочный сок – розовый цвет (рН 2)
Количественное определение кислотности сока проводится титрованием. В химический стаканчик наливают 1-5 мл желудочного сока, затем вносят фенолфталеин и метилоранж по 1-2 капли каждого, содержимое окрашивается в розовый цвет. Титруют содержимое 0,1% раствором NаОН до соломенно-желтого цвета. Отмечают количество щелочи, пошедшей на титрование. Продолжают титрование до оранжевого цвета. Снова отмечают количество щелочи, пошедшей на титрование. Смесь титруют дальше до красного окрашивания и отмечают количество щелочи.
Опыт до конца провести не удалось. Смесь не меняла свою окраску.
19.06.2023
Ферментативные свойства желудочного сока
Цель занятия: определить действие пепсина на белок крови и молока; определить оптимальные условия активности желудочного сока.
Материал и оборудование: Штатив с пробирками, мерные пипетки, водяная баня, спиртовка, сосуд со снегом, натуральный и нейтральный желудочный сок, фибрин, 0,5 % раствор соляной кислоты, дистиллированная вода.
В соке, выделяемом железами фундальной части желудка, содержатся следующие ферменты: протеолитические ферменты - пепсин и катепсин, катализирующие гидролиз пептидных связей белковых молекул, и химозин (ренин), створаживающий молоко; липолитический фермент - липаза, которая гидролизует нейтральные жиры на глицерин и жирные кислоты.
Шесть пробирок заранее нумеруют, заполняют, как указано в таблице. Шестую пробирку сразу после заполнений помещают в сосуд со снегом. Остальные - в водяную баню при температуре 37-400C. Через 40 минут ведут учет реакции.
| № п./п. | Содержимое пробирок | |
| 1 | 1мл жел. сока + фибрин | + |
| 2 | 1мл прокип. жел. сока + фибрин | - |
| 3 | 1мл нейтр. жел. сока + фибрин | - |
| 4 | 1 мл 0,5 % р-ра НСL + фибрин | - |
| 5 | 1мл дистил. жел. сока + фибрин | - |
| 6 | 1мл жел. сока + фибрин | - |
Действие желудочного сока на молоко
Четыре пробирки заполняют, как указано в таблице. Пробирку №4 сразу после заполнения помещает в сосуд со снегом, остальные - в термостат при температуре 38 - 40°С.
| №/п. | Содержимое пробирок | Результаты |
| 1 | 0,5 мл желуд. сока + 5 мл молока | + |
| 2 | 0,5 мл кипяч. сока + 5 мл молока | - |
| 3 | 0,5 мл нейтр. сока + 5 мл молока | - |
| 4 | 0,5 мл желуд. сока + 5 мл молока | - |
При низкой температуре реакция почти не протекает
Расщепление белка наступит только в первой пробирке, во второй - фермент разрушен кипячением, в третьей, где имеется только раствор HCl, фибрин будет набухшим, но не расщепившимся, в четвертой - создается щелочная среда, в которой фермент оказывается неактивным.
С молоком реакции почти аналогичны: в первой пробирке реакция пройдёт успешно, во второй - фермент разрушен кипячением, в третьей создается щелочная среда, в которой фермент оказывается неактивным, в последней - низкая температура не позволила пройти реакции.
20.06.2023