Варианты реакций агглютинации .
Наиболее распространенными являются пластинчатая РА на стекле и развернутая РА в пробирках или планшетах.
В пластинчатой РА используют сыворотки с небольшим разведением или неразведенные. Используют ее как ускоренный метод обнаружения антител или идентификации микроорганизмов. На стекло наносят каплю сыворотки, в которую петлей вносят неизвестную культуру бактерий, перемешивают и через 2-3 минуты наблюдают появление мелкозернистой или хлопьевидной агглютинации. Для контроля используют каплю физиологического раствора, в которой после внесения бактерий наблюдается помутнение. При использовании неадсорбированных сывороток реакция на стекле имеет только ориентировочное значение. Адсорбированные сыворотки позволяют сразу провести идентификацию микроорганизмов.
Развернутую РА проводят в пробирках или лунках планшетов. При этом диагностическую сыворотку разводят до титра и вносят одинаковые количества антигена. При положительном результате на дне пробирки образуется рыхлый осадок в виде "зонтика", при отрицательном – осадок в виде "пуговицы". Поскольку титры группоспецифических антител в сыворотке значительно ниже, чем титр видоспецифических, групповые реакции наблюдаются лишь в небольших разведениях сыворотки. Если агглютинация происходит до титра или до половины титра сыворотки, она является видоспецифической.
Для определения антител в сыворотке больного (серологический диагноз) используют стандартный микробный диагностикум, содержащий взвесь известных микробов или их антигенов. В этом случае также можно ставить пластинчатую и развернутую РА.
Реакция прямой агглютинации клеток.
Для определения групп крови используют стандартные сыворотки 0, А, В групп с титром >1:32 и контрольную АВ (IV) группы. При 18-25°С на планшет (тарелку) наносят по одной–две капли этих антисывороток, добавляют к ним в 8-10 раз меньшие капли крови из пальца или из пробирки и смешивают палочкой; осторожно покачивают в течение 3 мин. При наличии агглютинации, добавляют по 1 капле 0,9% раствора хлорида натрия и учитывают результат через 5 мин. При отсутствии агглютинации во всех трех смесях – нет антигена (0, I гр); если агглютинация с сывороткой 0 (I) и В (III), то имеется антиген А – группа А (II); если агглютинации в сыворотке 0 (I) и А (II), то имеется антиген В – группа В (III), наличие агглютинации во всех трех пробах при отсутствии в контрольной – АВ указывает на присутствие антигенов А и В – группа АВ (IV).
Применяется также проба на совместимость крови, когда капли крови донора и реципиента смешивают и оценивают агглютинацию.
В последнее время для определения групп крови используют моноклональные антитела с высокой активностью и специфичностью.
В клиниках применяют реакции агглютинации лейкоцитов, тромбоцитов и других клеток для выявления аутоантител, а также для определения антигенов на этих клетках.