2. Время и кратность осеменения кобыл.

Дата: 2025-06-02; Просмотры: 16

Оценка:

0.00 из 5.00 — оценок

Скачиваний: 0

Скачать

Тема 17. И с к у с с т в е н н о е о с е м е н е н и е к р о л ь ч и х и п т и ц ы .

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Ознакомиться с технологией искусственного осеменения сельскохозяйственной птицы и крольчих.

Оборудование: крольчихи и кролики, стимуляторы половой функции, петухи и куры, индюки и индейки, гусаки и гусыни, растворы фурациллина 1:5000, 70° спирт, шприцы- катетеры, полистироловые или стеклянные пипетки, микроскопы, покровные и предметные стекла, обогревательный столик, кипяченая вода, среды для разбавления спермы, спиртовые тампоны, стерильные ватные тампоны, электрические спермособиратели, флаконы из-под антибиотиков с пробками, свежеполученная сперма.

Осеменяют крольчих на пункте искусственного осеменения или в специальном помещении. После копуляции с вазектомированным самцом или введения гормонов (хориогонин, СЖК) самку фиксируют на специальном сто­лике спиной вниз. Ватным тампоном, увлажненным фурациллином (1:5000), обрабатывают наружные половые органы. Левой рукой слегка раскрывают половую щель, а правой рукой вводят во влагалище шприц-катетер (можно использовать специально подготовленный овечий), направляя его сперва вниз, а потом через лонное сращение переводят параллельно позвоночнику живот­ного.

При введении шприца нельзя допускать резких дви­жений. Сперму для осеменения используют свежеразбавленную по 0,3 мл или сохраняемую в течение 5—6 ч при 0°С по 0,4 мл с оценкой не ниже 6 баллов и 5— 10 млн. спермиев в дозе.

Если шприц проходит во влагалище трудно, самке дают успокоиться, после чего катетер вводят на 12— 14 см и вспрыскивают сперму во влагалище у шейки матки. Для искусственного осеменения птицы при птич­нике оборудуют небольшую лабораторию, моечную комнату для получения спермы. Рядом с пунктом раз­мещают помещения для содержания самцов.

Осеменяют птицу при помощи шприца-полуавтомата,

применяемого для осеменения овец, стеклянных или по­листироловых пипеток с резиновыми баллончиками. Ис­кусственно осеменяют птицу во второй половине дня: кур—один раз в 5 дней, гусынь—один раз в день и индеек—в начале сезона 2—3 раза через 1—2 дня, за­тем с интервалом 10—12 дней.

Сперму вводят в яйцепровод на глубину 4—5 см, неразбавленную или разбавленную в дозе: курам— 0,02—0,03 мл с количеством спермиев в дозе 100— 150 млн. и активностью 7 баллов; гусыням 0,05 мл све­жеполученной и 0,1—0,2 мл разбавленной спермы с со­держанием в дозе 30—50 млн. активных спермиев; ин­дейкам — 0,025—0,03 мл неразбавленной спермы с ко­личеством 80—100 млн. подвижных спермиев в дозе при подвижности не ниже 7 баллов.

Осеменение кур проводит бригада, состоящая из двух звеньев. Два человека получают сперму от петухов, вторые два или три человека проводят искусственное осеменение кур. При такой работе за час осеменяют до 500 кур.

При осеменении гусей два человека получают спер­му, оценивают ее и разбавляют, два других отлавлива­ют и проводят осеменение гусынь, при этом за бригадой закрепляют 1400—2500 гусынь. Сперму от индюков по­лучают один или два человека, осеменяют индеек двое, подают и фиксируют самок два или три человека. Ку­рицу, гусыню, индейку держат так, чтобы руки охваты­вали с двух сторон крылья, прижимая их к корпусу, а пальцы охватывали ноги.

Контрольные вопросы:

1. Техника искусственного осеменения крольчих.

2. Техника искусственного осеменения сельскохозяйственной птицы.

Тема 18. ОТТАИВАНИЕ, ОЦЕНКА ГЛУБОКОЗАМОРОЖЕННОЙ И СВЕЖЕПОЛУЧЕННОЙ СПЕРМЫ. ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С ЖИДКИМ АЗОТОМ.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Овладеть методикой оценки качества свежеполученной и оттаявшей глубокозамороженной спермы.

Оборудование: спермоприемники со спермой быка и барана, градуированные мензурки с профильтрованной спермой жеребца и хряка, сосуды Дьюара с глубокозамороженной спермой быка, барана и жеребца, столики Морозова, микроскопы, предметные и покровные стекла, стеклянные палочки или глазные пипетки, счетная камера Горяева, меланжеры лейкоцитарные и эритроцитарные,3% раствор хлорида натрия, растворы фуксина или эозина, 96° спирт, эфир, 2,9% раствор натрия лимоннокислого, чашки Петри, сливные чашки.

Решающим показателем качества производителя служат результаты ис­следования спермы. Высокие экстерьерные показатели и кровность теряют

всякое значение, если у производителя выявляется аспермия или неполноцен­ная сперма.

При получении спермы для оценки производителя пользуются искусствен­ной вагиной. Если сперма недоброкаче­ственная, ее исследуют повторно. Нельзя забывать, что после длительных перерывов в половой нагрузке (у жереб­цов весной) производитель при первом коитусе почти всегда выделяет сперму низкого качества.

Доброкачественная сперма содержит достаточное количество живых, устой­чивых во внешней среде и способных принять участие в оплодотворении спермиев; она свободна от посторонних примесей (крови, гноя, микробов).

Сперму исследуют макроскопически и микроскопически. При работе со спер­мой быка придерживаются ГОСТов. По стандартам определяют содержание спермиев с анормальной морфологией и наличие включений, количество мер­твых спермиев, размеры спермиев, их подвижность (активность), абсолют­ную выживаемость и ряд других показа­телей.

Макроскопическое исследование. Оно не дает оснований для заключения о пригодности или непригодности спер­мы. Но результаты его служат предпо­сылкой для тщательного микроскопи­ческого исследования спермы, которое позволяет установить качество спермы, а также причины изменения ее внешне­го вида.

Исследование спермы начинают с определения ее объема с помощью мерной пипетки, градуированного ци­линдра или мензурки. Можно опреде­лять массу эякулята взвешиванием на лабораторных весах с погрешностью не более ±0,08 г.

Цвет нормальной спермы белый или белый с желтым оттенком. Серова­тый или голубоватый оттенок — при­знак олигоспермии (недостаточное чис­ло спермиев). Интенсивный желтый цвет обычно указывает на примесь мочи. Розоватый или красноватый — признак примеси крови, как следствие свежей травмы. Буро-красный - указыва­ет на глубокую травму половых путей давнего происхождения. Зеленоватый оттенок сперма приобретает от примеси гноя. Хлопья в сперме наблюдаются при воспалении пузырьковидных желез.

Запаха нормальная сперма не име­ет или обладает легким запахом жиропота. При хронических, гнойных процессах в семенниках или в придаточных половых железах сперма может иметь гнилостный запах.

Консистенция спермы быка сливкообразная, барана — сметанообразная, жеребца и хряка — сходная с мо­локом.

Качественные показатели спермы

Микроскопическое исследование спермы. При микроскопическом исследова­нии, прежде всего, определяют густо­ту и подвижность (актив­ность) спермиев. По густоте спермы ориентировочно устанавливают насыщенность ее спермиями, относя к густой (Г), средней (С) или редкой (Р). У быков оценка Г ставится, если все поле зрения микроскопа заполнено спермиями и в пространстве между ними не укладывается длина одного спермия. Средней считают сперму, ког­да между спермиями хорошо выражены промежутки, равные приблизительно длине спермиев. В редкой сперме рас­стояние между спермиями превышает их длину.

Сложнее определять густоту спермы производителей с маточным типом осе­менения, так как у них секреты прида­точных желез очень сильно разбавляют спермиев. У всех видов животных оцен­ка по густоте не позволяет точно устано­вить насыщенность спермы спермиями, поэтому с переходом на использование разбавленной спермы при оценке эякулята определяют концентрацию спер­миев.К использованию допускают сперму быков, хряков и жеребцов с оценкой Г и С, а у баранов — только Г.

Подвижность спермиев оценивают по 10-балльной системе. Каждый балл равен 10 % спермиев, об­ладающих поступательным движением. Если спермии имеют манежное движе­ние (по кругу) или только колеблются, качество спермы оценивают буквой К (колебательное движение). Сперму с не­подвижными спермиями обозначают буквой Н (некроспермия).

Подвижность неразбавленной спер­мы быка определяют при температу­ре 40 °С. На теплое предметное стек­ло наносят каплю спермы и 2—4 капли 3%-ного раствора цитрата натрия, пере­мешивают, накрывают покровным стек­лом и просматривают не менее трех по­лей зрения. Поскольку оценка спермиев по подвижности достаточно субъектив­на, то для контроля в необходимых слу­чаях можно определять количество жи­вых и мертвых спермиев.

При оценке спермы на густоту и подвижность спермиев применяют комплексное обозначение, позволяю­щее удобно отражать ее качество. Например, Г-10 баллов означает, что ис­следуемая сперма густая и 100 % спермиев обладают головным прямолиней­ным, движением; Г-9 баллов означает 90%, 8—80, Г-7—70% подвижных спермиев и т. д.

Концентрацию спермиев (количество в 1 мл эякулята) наибо­лее точно определяют в счетной камере Горяева или другого автора (см. Практи­кум по акушерству). Это один из основ­ных показателей качества спермы, на который ориентируются при разбавле­нии эякулята.

Для определения концентрации спермиев жеребцов Г. В. Паршутин и Е. В. Румянцева сконструировали специальные стандарты. Они представ­ляют собой запаянные пробирки, содер­жащие жидкость, имеющую цвет, соот­ветствующий той или иной известной концентрации спермы. Для определе­ния концентрации исследуемую сперму наливают в пробирку с диаметром стан­дартных пробирок, устанавливают ря­дом с ней пробирки стандарта и подби­рают наиболее подходящий по виду стандарт, на котором отмечено количе­ство спермиев в 1 мл спермы.

Концентрацию спермиев в эякулятах хряка удобно определять оптическим стандартом С. И. Сердюка.

В настоящее время станции искусст­венного осеменения пользуются фотоэлектроколориметрическим (ФЭК) методом, основанным не на прямом подсчете спермиев, а на учете степени оптичес­кой плотности спермы, т. е. мутности. Этот метод позволяет быстро (2—3 мин) определить концентрацию спермиев в сперме, но так как ФЭК создан для анализа истинных ра­створов, а сперма является взвесью и в ней содержится большее или меньшее количество эпителиальных и других клеток, то результат нередко может быть неточным.

Определение количе­ства мертвых спермиев. В. А. Морозов предложил использовать красители, которые окрашивают спер­миев только мертвых и с колебательны­ми движениями. Самый простой способ определения на скоростном (за 37— 40 с) авто­матическом счетчике клеток — целлоскопе. С этой целью можно использовать и венгерский прибор «Пикоскель». Способ окраски спермы быков следующий. Ис­следуемая сперма должна иметь кон­центрацию спермиев 0,2—0,4 млрд./мл, при более высокой концентрации эякулят разбавляют 3%-ным раствором цит­рата натрия до указанного показателя. Готовят 1—5%-ный раствор эозина водо-растворимого на 3%-ном растворе ли­моннокислого натрия. На чистое обез­жиренное теплое (35 ± 2 °С) предметное стекло наносят каплю спермы, добавля­ют 2—3 капли краски, подогретой до 30 °С, смешивают 2—4 с и делают три тонких мазка, которые высушивают.

Определение содержа­ния патологических форм спермиев и включений спермы у быков проводят в мазках, окрашенных азур-эозином или другими красителя­ми, где подсчитывают 100—200 сперми­ев и различные включения. Среди нор­мальных спермиев всегда находится бо­лее или менее значительное количество патологических форм. Чаще аномалии выявляются в хвостовой части сперми­ев, основании головки и шейки. С воз­растом к моменту физиологической зре­лости производителя количество ано­мальных спермиев уменьшается. Могут встречаться самые различные патологи­ческие формы спермиев: гигантского размера или карликовые, спермии с дву­мя-тремя головками, но общим хвос­том, с двумя хвостами, с укороченным хвостом, его деформацией или отсут­ствием, с цитоплазматической капелькой, слишком большой или маленькой головкой и другие формы. Иногда встречаются спермии, лишенные голов­ки, но способные двигаться.

Л. А. Черномаз отмечает как признак патологических спермиев слабо выра­женный перфораторий или его отсут­ствие. Нарушение структуры перфоратория и оболочки спермия — признак начальных изменений спермиев при их хранении.

Большое количество патологических спермиев свидетельствует о нарушении спермиогенеза, о вредном влиянии па­тологически измененных секретов при­даточных половых желез и мочевых пу­тей или, наконец, указывает на наруше­ние правил получения спермы и ее хра­нения во внешней среде от выделения до исследования.

В качестве конкретных причин обра­зования уродливых форм спермиев от­мечают: слабо развитые семенники; по­ражения семенника и придатка (гигант­ские и карликовые спермии), длитель­ные промежутки между коитусами, обусловливающие старение и распад спермиев в придатке (отдельные голов­ки, изолированные хвосты), половое ис­тощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недоста­точного кормления (спермии с цитоплазматическими капельками в области шейки, тела и хвоста — незрелые спер­мии). Чем ближе к головке расположена капелька, тем моложе спермии.

Большое значение в образовании па­тологических форм спермиев придается нарушению терморегулирующей функ­ции мошонки.

Закручивание хвостов спермиев в сторону происходит при смешивании спермы с гипотоническим раствором (неправильная подготовка разбавите­лей, попадание воды).

При микроскопическом исследова­нии спермы выявляются следующие включения: клетки плоского, переход­ного эпителия, клетки семенных канальцев (зернистые), форменные эле­менты крови — эритроциты и лейкоци­ты, гиалиновые шары, круглые или овальные, иногда слоистые и напомина­ющие зерна крахмала, амилоидные тельца, сильно блестящие — лецитиновые зернышки, кристаллы спермина и др. Если примесей в сперме мало, это считается нормой. Если примесей мно­го, необходимо выявить их источник и причину. Значительное количество патологи­ческих спермиев следует, безусловно, расценивать как признак наступающей импотенции.

Дегидрогеназная активность спермы быка определяется скоростью обесцвечивания метиленовой сини в капилля­рах или в пробирках (метод Н. П. Шергина). Первый вариант получил более широкое распространение в практике. На предметное стекло, подогретое до 30—37°С, наносят каплю спермы и до­бавляют теплой пипеткой каплю 0,01%-ного раствора метиленовой сини, подогретого до 30°С. Капли тщательно перемешивают и набирают смесь в теп­лую (30—37 °С) стеклянную трубку дли­ной 5—6 см с внутренним диаметром 0,8—1 мм, чтобы высота столбика была 2—3 см. Заполненную смесью трубочку

кладут горизонтально на лист белой бу­маги в термостат с температурой 37 ± 0,5 °С. Записывают время начала исследования и окончания обесцвечи­вания метиленовой сини. Дегидрогеназную активность спермы (Да) в условных единицах вычисляют по формуле:

Да=ПсtС/10,

где Пс—подвижность спермиев, баллы; t—вре­мя обесцвечивания метиленовой сини в опыте, мин; С — концентрация спермиев, млрд./мл; 10 — постоянный коэффициент.

Все исследования спермы проводят при строгом соблюдении действующих стандартов и инструкций по искусст­венному осеменению сельскохозяй­ственных животных.

В результате исследования могут быть установлены следующие недостатки:

асперматизм (Азм) — отсутствие спермы;

олигосперматизм (Озм) — малый объем эякулята;

аспермия (А) — отсутствие в сперме спермиев;

олигоспермия (О) — недостаточное число спермиев в эякуляте;

некроспермия (Н) — мертвые спермии;

тератоспермия (Т) — патологические спермии и др.

Производителя можно использовать для естественного или искусственного осеменения, если его сперма отвечает требованиям действующей инструкции по осеменению животных.

Биологическая проба спермы. Решаю­щее значение для оценки спермы имеет определение оплодотворяющей способ­ности спермиев. Установлено, что она может быть выявлена только в отноше­нии определенной группы самок, нахо­дящихся при конкретных условиях су­ществования и времени осеменения. Оплодотворение зависит от степени родства самки и производителя, состоя­ния их здоровья, упитанности, качества кормления и др. Поэтому для определе­ния оплодотворяющей способности спермы лучше всего использовать здо­ровых ремонтных телок. Правильно по­ставленная биологическая проба спер­мы на здоровых животных — самый на­дежный критерий ее оценки. Все другие методы являются только косвенными, т. е. они позволяют лишь условно судить об оплодотворяющей способности спермы. Сперма считается нормальной, если оплодотворяемость от первого осе­менения составляет не менее 70—75 %. Быки с пониженной оплодотворяющей способностью спермы дают маложиз­ненное потомство, и их нельзя исполь­зовать ни при искусственном, ни при ес­тественном осеменении.

Наблюдения показали, что даже все­стороннее лабораторное исследование спермы иногда не отражает ее качеств. От некоторых жеребцов с прекрасными лабораторными показателями спермы оплодотворяемость кобыл оказывалась низкой, если интервалы между садками были больше 48 ч. Осеменение кобыл через 24—36 ч этими же производителя­ми давало резкое повышение плодови­тости.

В жаркие летние месяцы оплодотворяемость коров от замороженной спер­мы, как правило, низкая. Наиболее бла­гоприятное время для заготовки заморо­женной спермы — весна и осень. Спер­ма некоторых быков плохо заморажива­ется.

Разработана методика замораживания| спермы жеребцов в гранулах или алюминиевых пакетах (Е. М. Платов и др.).