7 билет. 9. Культивирование вирусов в живых биологических системах.
Культивирование вирусов человека и животных проводят с целью лабораторной диагностики вирусных инфекций, для изучения вопросов патогенеза и иммунитета, получения диагностических и вакцинных препаратов. Поскольку вирусы являются абсолютными паразитами, то их культивируют или на уровне организма, или на уровне живых клеток, выращиваемых вне организма в искусственных условиях. В качестве биологических моделей для культивирования используют лабораторных и естественно-восприимчивых животных, развивающиеся куриные эмбрионы и культуры клеток.
Лабораторные животные (белые мыши, крысы, кролики, золотистые хомячки) и естественно-восприимчивые (молодняк сельскохозяйственных и непродуктивных животных, обезьяны и др. В настоящее время использование этой модели для диагностики ограничено из-за невосприимчивости животных ко многим вирусам. Следует отметить, что не все вирусы можно культивировать в организме лабораторных животных. Это зависит от чувствительности животных к вирусам. Например, вирус осповакцины человека репродуцируется в организме всех животных. Наоборот вирус оспы свиней репродуцируется только в организме этого вида животных. Факторы, влияющие на чувствительность животных к вирусам: 1.Чувствительность животных к вирусам зависит от возраста. Наиболее восприимчивы к ним молодые животные – мышата, крольчата и т.д., так как у них нет совершенной системы защиты организма. 2.На чувствительность животных к вирусам влияет и наличие неспецифических ингибиторов, которые выполняют защитную функцию организма. В организме молодых животных содержание ингибиторов мало, с возрастом их концентрация увеличивается и соответственно повышается сопротивляемость организма к вирусам. 3.Чувствительность к вирусам зависит от пола животных, наиболее чувствительны животные женского пола. Перед заражением всех животных выдерживают в карантине в течение 2–3х недель. Для культивирования вирусов используют только животных клинически здоровых, одного возраста и породы и из хозяйства, благополучного по инфекционным заболеваниям. В последние годы начали использовать для культивирования гнотобиотов (безмикробных (стерильных) животных). Метод заражения подопытных животных подбирают с учетом тропизма культивируемого вируса, например, для культивирования нейротропных вирусов, развивающихся в клетках нервной системы, животных заражают в головной мозг, для пневмотропных – интраназально или интратрахеально и т.д. Недостатки культивирования вирусов в организме животных: 1. Не все вирусы культивируются в организме лабораторных животных. 2.Лабораторные животные потенциально не свободны от различных скрытых инфекционных заболеваний. 3. Материальные затраты на кормление, содержание животных. Цели использования лабораторных животных: 1. Обнаружение и первичное выделение вируса из патматериала.2. Накопление вирусной биомассы (биопроба).3. Поддержание вируса в активном состоянии (пассаж).4. Титрование вирусов. 5. Получение гипериммунных сывороток. 6. Тест-объект в реакции нейтрализации.